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一、培養基概述
培養基是指由人工配制而成的，適合微生物生長繁殖或積累代謝產物的，微生物培養、分離、鑒別、研究和保存用的混合營養基質。 微生物的營養要素，即碳源、氮源、能源、生長因子，無機鹽和水。一方面，如何合理地利用這些營養要素，設計出合理的培養基配方是個問題；另一方面，設計出的培養基是否符合微生物的生長需求、代謝物的環境要求、經濟等方方面面也是問題，都值得我們深入研究。
2.不同狀態培養基的作用 固體培養基：用于分離、純化、鑒別、技數和保存微生物菌種等。
液體培養基：用于擴大培養、搖瓶研究和鑒別性研究。 半固體培養基：用于厭氧菌培養菌分離和培養、觀察微生物運動、保藏微生物菌種等。
3.常見培養基 常見的基礎培養基：比如，LB培養基、YPD培養基、PDA培養基、MRS培養基…… 常見的選擇培養基：比如，以纖維素為唯一碳源的培養基可用于篩選纖維素降解菌、無氮培養基只能供有固氮能力的固氮菌生長…… 常見的鑒別培養基：比如，EMB培養基（伊紅-亞甲藍培養基）
（二）培養基配制的步驟和注意事項 1.液體培養基的配制 培養基的配制跟做菜一樣，一樣都不能落下，需要找原料配料、原料溶解后需要調節溶液pH值、分裝、包裝、滅菌等步驟。
(2) 稱量：將所有物品放在天平左側，依次稱量各試劑，倒入燒杯中。稱完每種試劑，放到天平右側，標記√或×或—。 要選擇合適的天平進行稱量，量少選用電子天平，量多選用分析天平，如果是大量的試劑，則選用臺秤。
(3) 溶解：先加入2/3水溶解，待全部溶解后，定容。
(4) 調節pH值：除特殊說明，一般用1mol/LNaOH或1mol/LHCl調節溶液pH。 可以用pH試紙也可以用pH計，pH試紙比較粗略，pH計精確但需要經常校準。
(5)分裝：根據試驗要求，將液體培養基分裝至三角瓶或其他容器內。
透氣膜使用方便，一般不重復使用；棉花塞透氣性好，麻煩不美觀，可以重復使用，根據需要使用。
(7)滅菌：將上述配制好的培養基放入高壓蒸汽滅菌器中滅菌，設定合適的溫度和時間。 (8)冷卻：待滅菌完成后，取出，冷卻，冷卻后使用。 (9)整理：將試劑和其他物品放回原處，擦拭臺面。 2.固體培養基的配制 固體培養基和液體培養基的區別在于：一個是固體，一個是液體；一個加了凝固劑瓊脂粉，另一個沒加凝固劑；固體培養基用于分離、培養、鑒別菌種，液體培養基用于擴大培養。 (1)計算：同液體培養基配制。 (2)準備培養皿：將試管和培養皿洗凈、干燥，使各培養皿蓋方向一致，用牛皮紙或報紙包好，注明皿蓋的方向，高壓蒸汽滅菌或干燥滅菌后烘干備用，也可直接使用一次性無菌培養皿。 玻璃培養皿可以重復利用，處理麻煩；一次性培養皿省事，成本高。 (3)稱量：除瓊脂粉外，其余試劑稱量同液體培養基配制。先不稱量瓊脂粉。 (4)溶解：溶解步驟同液體培養基配制。 (5)調節pH值：同液體培養基配制 (6)稱量：稱量瓊脂粉，將瓊脂粉與液體混勻。 (7)加熱溶解：在常溫下瓊脂粉不溶，需要加熱溶解，不需要分裝的也可以直接滅菌。 滅菌之后要搖勻，否則瓊脂粉沉在底部，容易不凝固或太硬。 (8)分裝：固體培養基分裝需要在瓊脂粉溶解后進行分裝。 試管1/4高度，三角瓶不超過1/2容積，對于好養菌的培養，三角瓶容積的1/10，也可根據目標菌的培養條件，適當調整。 (9)封口：試管用試管塞封口，然后包上牛皮紙，用皮筋或棉線捆綁；三角瓶用透氣膜或紗布封口，用皮筋或棉線捆綁。標記培養基名稱、日期等信息。 硅膠塞透氣性差，使用方便，棉花塞透氣性好，麻煩不美觀，根據需要使用。
(11)冷卻：待滅菌鍋溫度降至80℃以下，取出培養基，輕輕搖勻，準備倒平板，或擺斜面。 待溫度降至50℃左右，取出尚未凝固的培養基置于超凈工作臺內，略打開無菌培養皿蓋露一小縫 )，倒入培養基，封蓋、冷凝，凝固后倒置備用。 (12)整理：將試劑和其他物品放回原處，擦拭臺面。 3.注意事項： (1)要選擇合適的天平進行稱量，量少選用電子天平，量多選用分析天平，如果是大量的試劑，則選用臺秤。 (2)易吸潮的試劑，稱量動作要快。
(3)易與稱量紙粘連一起的試劑，可以將試劑與稱量紙一起放入水中，試劑與稱量紙分離后，取出稱量紙。 (4)詳細記錄培養基的名稱、配方、來源、各成分的廠家批次，最好保留樣品以備后續檢驗。 (5)滅菌條件不一致的試劑，要單獨稱量，單獨滅菌。
(6)調節溶液pH，不能過酸過堿來回調節，盡量不要調過，以免影響溶液中離子濃度。
(7)配制試管培養基，要將試管豎起來，不能平放。 (8)試管封口有棉塞、硅膠塞、橡膠塞和試管塞，可以根據用途，進行選擇。 (9)倒平板之前，要靠壁搖勻，不能有氣泡，否則既不美觀，也不實用。 (10)擺斜面時，斜面不能太長，容易污染，斜面太短可以使用，但有點浪費空間。 (11)配制好的培養基要盡快滅菌。 
1.定義
4.培養基的選擇原則
目的要明確：明確培養哪類微生物，產物是什么，用途等等
營養協調：參考微生物細胞組成元素。
理化適宜：培養基的pH、滲透壓等物理化學條件較為適宜。
二、微生物培養基的制備
（一）不同微生物的培養條件和最適培養基配方
比如，枯草芽孢桿菌，最適培養條件：37℃、pH7，最適培養基配方：營養瓊脂培養基；
大腸桿菌，最適培養條件：37℃、pH7，最適培養基配方：LB培養基；
酵母菌，最適培養條件：30℃、pH5，最適培養基配方：YPD培養基；
乳酸菌，最適培養條件：37℃、pH6，最適培養基配方：MRS培養基；
霉菌，最適培養條件：28℃、pH5.5，最適培養基配方：PDA培養基；
鏈霉菌，最適培養條件：28℃、pH5.5，最適培養基配方：高氏1號培養基……
(1) 計算：根據培養基配方，計算實際用量，記錄實際稱量質量。用類似表格進行記錄。
(6)封口：用透氣膜或棉塞封口。標記培養基名稱、日期等。
(10)滅菌：將上述配制好的培養基放入高壓蒸汽滅菌器中滅菌，設定合適的溫度和時間。還有部分不能滅菌的試劑，需要采用過濾除菌。
比如，胰蛋白胨和酵母浸粉適合121℃，滅菌20min；葡萄糖適合115℃，滅菌20min，氨芐需要過濾除菌。
斜面長度不超過試管的1/2-2/3，斜面過長容易染菌，不能使用，應舍棄。
