在线观看亚洲精品专区-在线观看亚洲免费-在线观看亚洲免费视频-在线观看亚洲欧美-欧美freexxx-欧美free嫩交video

食品伙伴網(wǎng)服務號

稀釋涂布平板法的幾個誤區(qū)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-07-25
核心提示: 稀釋涂布平板法是一種常見的微生物計數(shù)方法,該方法通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)推測樣品中活菌個數(shù),其原理是將待測樣品稀釋適
 稀釋涂布平板法是一種常見的微生物計數(shù)方法,該方法通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)推測樣品中活菌個數(shù),其原理是將待測樣品稀釋適當倍數(shù),使樣品中的微生物細胞分散開。再取一定量的稀釋液均勻涂布到固體培養(yǎng)基表面。讓分散開的單個細胞繁殖得到一個菌落.這樣就可以通過肉眼可見的菌落數(shù)推理肉眼不可見的微生物細胞數(shù)。

 

稀釋涂布平板法計數(shù)微生物的計算公式為每克樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×M,C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時所用稀釋液的體積,M代表稀釋倍數(shù)。學生對該公式的理解存在多種認知誤區(qū),導致此類問題得分率低,現(xiàn)結(jié)合典型試題進行分析。


誤區(qū)一 對平均菌落數(shù)的理解
01

公式中的C不一定是所有實驗所得菌落數(shù)的平均值。為增強實驗說服力和減小實驗誤差,本實驗應設置對照實驗和重復實驗。此實驗的對照實驗是將未涂布菌液的培養(yǎng)基放置在相同條件下培養(yǎng),其目的是排除培養(yǎng)基污染對實驗結(jié)果產(chǎn)生的影響。若空白對照組平板出現(xiàn)菌落,則說明空白對照組的平板被污染,進而推測實驗組平板也可能被污染,這種情況不能直接將實驗組平板的菌落數(shù)取平均值,應重新進行實驗,只有空白培養(yǎng)基沒有出現(xiàn)菌落,實驗結(jié)果才可信。此實驗的重復實驗是將同一稀釋度的稀釋液至少涂布3個平板(一般設置3—5個平板)。選擇菌落數(shù)在30—300的平板計算平均菌落數(shù)。若重復實驗中某個平板的菌落數(shù)與其他差別甚遠,如四個平板的菌落數(shù)分別為42、200、256、234,菌落數(shù)42與其他數(shù)值差異過大,說明該平板操作過程有誤,則該菌落數(shù)應舍棄。若舍棄后不足三個平板,不能用菌落數(shù)相近的兩個平板取平均值,應找到原因并重做實驗。若計算每克樣品中的某種菌株數(shù),則C應代表某一稀釋度下平板上生長的符合該菌菌落特征的菌落數(shù)的平均值,培養(yǎng)基上其他菌種形成的菌落數(shù)不能一并計算在內(nèi)。如檢測1L待測水樣中的大腸桿菌數(shù)目只統(tǒng)計大腸桿菌菌落數(shù)的平均值。


誤區(qū)二 對稀釋倍數(shù)的判定
02

平板中菌落數(shù)過少會導致計數(shù)誤差過大,菌落數(shù)過多又會造成計數(shù)困難,為確保有效活菌數(shù)的準確測定,應合理設定稀釋倍數(shù)。待測樣品中微生物數(shù)量越多,所需稀釋倍數(shù)越大,而微生物數(shù)量越少,所需稀釋倍數(shù)越小。如測定土壤中細菌數(shù)量,一般選用104、105和106倍稀釋:測定放線菌數(shù)量,一般選用103、104和105倍稀釋;測定真菌數(shù)量,一般選用102、103和104倍稀釋:測定自來水中大腸桿菌數(shù)量,一般不稀釋,直接進行涂布培養(yǎng)。人教版高中生物教材給出的樣品稀釋的流程示范是將10g土樣加入到90mL無菌水中得到稀釋10倍的樣液,從稀釋10倍的樣液中取1mL加入到9mL無菌水中得到稀釋100倍的樣液,依次類推。若取6g土樣配制成稀釋10倍的土壤溶液,則土壤占混合液的10%,土壤溶液總量為60mL,應添加54mL的無菌水。若取1g土樣配制成稀釋100倍的土壤溶液,則土壤占混合液的1%,土壤溶液總量100mL,應添加99mL的無菌水。


誤區(qū)三對體積與質(zhì)量的單位換算
03

微生物計算公式中的V代表涂布平板時所用稀釋液的體積.通常為0.1mL。但若待測樣品中微生物數(shù)目較少,接種0.1mL經(jīng)培養(yǎng)后平板上菌落數(shù)達不到30?稍龃蠼臃N量(如接種1mL)。試題中經(jīng)常改變涂布平板時所用的稀釋液和所求樣品的體積和質(zhì)量,要注意做好單位換算,如1cm3=103μL=1 mL=10L。體積和質(zhì)量的換算公式是體積=質(zhì)量:密度(V=m/p),水的密度是1g/cm3.則質(zhì)量頭1 g的水的體積是1 cm3即1 mL。


誤區(qū)四 對統(tǒng)計誤差的分析
04

從稀釋涂布平板計數(shù)的原理分析,運用該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。因為樣品一般不易完全分散成單個細胞,當兩個或多個活細胞連在一起時。平板上觀察到的只是一個菌落,從稀釋涂布平板計數(shù)的過程分析 稀釋倍數(shù)是否合適、涂布是否均勻、培養(yǎng)環(huán)境是否能保證微生物正常生長、計數(shù)是否存在漏計或重復計數(shù)等情況都會影響統(tǒng)計結(jié)果。除此之外,還要考慮培養(yǎng)時間對菌落數(shù)目的影響。菌落數(shù)目需要每隔一段時間統(tǒng)計一次,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,防止因培養(yǎng)時間不足遺漏菌落的數(shù)目。

編輯:songjiajie2010

 
分享:
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 檢驗技術(shù)搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]
 

 
 
推薦圖文
推薦檢驗技術(shù)
點擊排行
檢驗技術(shù)
 
 
Processed in 0.027 second(s), 13 queries, Memory 0.95 M
主站蜘蛛池模板: 67pao强力打造 | 伊人久久大香线蕉资源 | 日本tv欧美tv天堂 | 亚洲色图综合在线 | 91极品女神私人尤物在线播放 | 国产三级精品最新在线 | 你懂的网站在线观看网址 | 黄网免费观看 | 久草tv| 国产精品久久久久久久午夜片 | 亚洲精品久久久久久婷婷 | 四虎在线最新永久免费 | 天天想天天干 | 毛片不卡一区二区三区 | 亚洲午夜精品久久久久久抢 | 国内精品免费视频自在线 | 成人免费看黄页网址大全 | 中文字幕在线一区二区三区 | 久久婷婷综合五月一区二区 | 成人欧美一区二区三区的电影 | 奇米9999| 永久免费看毛片 | 香蕉久久夜色精品国产2020 | 色偷偷亚洲男人 | 免费日本网站 | 国产老师的丝袜在线看 | 久久九色 | www.97色 | 天天综合天天 | 一级aa 毛片高清免费看 | 一级毛片女人喷潮 | 美女艹逼视频 | 在线观看视频一区二区三区 | 狠狠干狠狠搞 | 午夜高清福利 | 亚洲最大毛片 | 日本黄色网页 | 日日噜夜夜噜 | 亚洲精品色图 | 欧美黄色免费网站 | 国产小视频免费看 |