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GB 4789.2-2022 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定

放大字體  縮小字體 發布日期:2024-08-19
核心提示: 01稀釋度的選擇 液體樣品可直接取原液進行檢驗;固體或者半固體則必須依據檢驗經驗,選取1-3個適宜稀釋度進行檢驗(一
 
01
稀釋度的選擇

 

液體樣品可直接取原液進行檢驗;固體或者半固體則必須依據檢驗經驗,選取1-3個適宜稀釋度進行檢驗(一般樣品選取1:10,1:100,1:1000三個稀釋度進行檢驗。若遇到不常做的樣品,可適當延長稀釋度至1:10000甚至更大)。

 

02
空白實驗

 

分別吸取1mL滅菌生理鹽水到平皿中做空白對照,若空白有菌落生長則該實驗無效。

 

03
培養基的傾注

 

根據對樣品污染情況的估計,若樣品有表面蔓延生長的可能性,則待第一次傾注的瓊脂凝固后,可在表面再覆蓋一層瓊脂以避免菌落蔓延而難以計數。

 

04
菌落總數的計算

 

本標準的難點在于菌落計數及計算。

 

1)菌落計數時,從低稀釋度的平板開始計數。若所有平板上的菌落數均小于30CFU,則需計數所有平板上的菌落數,但僅采用最接近30CFU的兩個平板的菌落數來計算最終菌落數。

 

以固體樣品為例,菌落數選取、計算過程及結果修約如下:

 


 

2)當第一稀釋梯度一個板上菌落數高于30,另一個低于30,則依據標準應當以介于30-300之間的菌落數作為該稀釋梯度的菌落數。

 

以固體樣品為例,菌落數選取、計算過程及結果修約如下:

 


 

3)若所有平板上的菌落數均大于30CFU,則只計數30-300CFU之間的平板上的菌落數,并采用這些數據,依據標準中給出的公式,進行最終菌落總數的計算,此時將大于300CFU的記為“多不可計”,以TNTC表示。

 

4)若所有稀釋度的平均菌落數都大于300,則不能所有都記為TNTC,必須將最高稀釋度的兩個平板上的菌落數逐一的計數,再計算平均數,該平均數為該梯度的菌落總數,其余平板上的菌落數可記為TNTC。

 

以固體樣品為例,菌落數選取、計算過程及結果修約如下:

 


 

5)若所有平板均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀釋倍數。

 


注意:最低稀釋度的選擇對結果存在較大的影響。如:某樣品經多次檢驗后發現菌落總數較高,檢驗人員在梯度稀釋后取1:1000,1:10000,1:100000三個梯度的稀釋液傾注平板,最終所有平板上均無菌落生長,則計算結果為<1000CFU/mL。若選取1:10,1:100,1:1000三個梯度的稀釋液傾注平板,均無菌生長,則最終結果為<10CFU/mL。

 

6)最低稀釋度兩個平板只有一個平板上長了1個菌落,若為固體樣品且本次檢驗的最低稀釋倍數為1:10,此時計算過稱為(1+0)/2×10=5,由于默認固體樣品的最小檢出量為10CFU,固本次檢驗的菌落總數結果為10CFU。

 

注意:對于該情況,一直存在爭議,不同的檢驗人員可能做法不一,有人保留為5CFU,有人保留為10CFU,并無固定做法,建議實驗室保持一貫做法,不要隨意更改。

編輯:songjiajie2010

 
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