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只會菌株保藏可不行!還缺這一步!

放大字體  縮小字體 發布日期:2019-07-23  來源:食品微生物檢測工作指南
核心提示:只會菌株保藏可不行!還缺這一步。
定期檢查菌種保藏效果,有污染或退化跡象時,要及時分離純化復壯。每次檢查要有詳細記錄。


(一)復核的定義

對保藏的各類微生物菌種,在接收和保藏過程中,為保證菌種質量而對鑒定結果進行的核查。包括對菌種活性、純度、穩定性等的檢測,以及采用最新分類學觀點對分類地位發生變化的菌種的重新鑒定。


(二)復核菌株的基本信息

復核記錄應標明所復核菌株的以下基本信息:保藏中心名稱、保藏方式、菌株保藏編號、菌株名稱(原定名)、復核日期、復核內容及結果(所進行的實驗項目及各項實驗結果)、復核結論、復核人員姓名、中心負責人簽字以及需要補充說明的有關內容。

 

(三)存活性檢測

微生物菌株復核時有必要進行存活性檢測。該項檢測應將采用不同保藏方法保存的培養物接種于適當的培養基,在合適的條件下培養,檢查其保藏后的生長情況,確定適用的長期保藏技術方法。


(四)純度檢測

微生物菌種復核時必須進行純度檢測。規定以下兩種檢測方法同時進行。

1.顯微鏡觀察

全部的細胞個體形態相似,染色反應一致或與原純菌的描述一致。


2.培養并確認

將培養物制成懸液,重新傾注平板,或平板劃線培養后,所形成的全部菌落形態一致或相似。


(五)復核鑒定

1.細菌的復核鑒定

針對具體類群,從以下幾個方面選擇有代表性、鑒別性的特征特性進行復核鑒定。

(1)顯微形態觀察

如細胞形狀、鞭毛、芽孢以及放線菌的菌絲、孢子絲和孢子的觀察;革蘭氏染色和抗酸染色反應等。


(2)培養特性

水溶性色素和非水溶性色素的觀察,其他特定培養基上特征的觀察。


(3)細胞化學組分分析

對于放線菌和部分高G+C含量革蘭氏陽性細菌應對細胞壁化學組分進行必要的分析。

必要時進行序列測定。


2.酵母菌的復核鑒定

對于多數常用或常見的酵母菌,可依據表型信息對鑒定結果的正確性進行核查。

(1)培養特性

菌落質地、顏色、高度、生長速度、對溫度的適應范圍等。


(2)顯微形態觀察

如細胞大小和形態、無性繁殖方式、假菌絲形成與否;有性生殖方式、子囊孢子或擔孢子的形態特征。


(3)生理生化特征

可采用商業化的生化鑒定系統,或通過手工配制生理生化特性鑒定培養基,檢測菌種的生理生化特性。


必要時進行序列測定。當需復核的菌種缺少序列測定數據時,應將測定26S rDNA D1/D2和ITS區的堿基序列作為復核鑒定的內容之一。


3.霉菌的復核鑒定

霉菌的復核鑒定主要依據不同分類群的培養特征和顯微形態特征。

(1)培養特性

菌落(菌叢)質地、顏色、菌落反面的顏色、生長速度、氣生菌絲高度、對溫度的適應范圍、色素的產生情況。


(2)營養體細胞的構造

顯微鏡觀察營養體細胞的構造。


(3)無性生殖或(和)有性生殖特征

顯微鏡觀察無性生殖或(和)有性生殖特征。

編輯:songjiajie2010

 
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