高壓蒸汽滅菌是微生物實驗常用的滅菌方法,根據(jù)容量大小不同可分為手提式、立式、臥式三種。高壓滅菌鍋廣泛應用于各大專院校、醫(yī)療衛(wèi)生、食品化工、生物科研等單位對器械、敷料、器皿、藥液、培養(yǎng)基等物品的滅菌處理?汕f別不重視它,一不小心,可能釀成大禍!
一.使用中要注意的事項
1.滅菌溫度應是一個溫度范圍,而不是一個固定值
通常,高壓蒸汽滅菌溫度是一個固定值,如,試管斜面培養(yǎng)基和搖瓶液體培養(yǎng)基的滅菌要求為:121℃,20min,但在121℃只是滅菌溫度的下限,實際的滅菌溫度在121℃~124℃(或123℃)之間波動。如果是自動控溫型滅菌鍋,設定好滅菌溫度下限為121℃后,當溫度升到124℃(或123℃)時,自動斷電停止加熱,當溫度降到121℃時,自動開始加熱;如果是手動控溫型滅菌鍋,當溫度升到124℃時,手動切斷電源停止加熱,當溫度降到121℃時,手動接通電源開始加熱。
二、初次使用的安全檢測很有必要
非自動控溫型滅菌鍋:
①手動打開安全閥,看安全閥是否正常;
②加熱升溫過程中,看壓力表指針的上升狀況是否有受阻情況發(fā)生,沒有受阻,可正常使用。
自動控溫型滅菌鍋的簡易安全檢查:
①手動打開安全閥,看安全閥是否正常;
②加水時,觀察水位指示燈是否正常顯示水位狀況;
③在排除冷空氣的前提下, 觀察顯示屏上的溫度和壓力表指示溫度的差,通常情況下,壓力表上的溫度略高于顯示屏上的溫度,此壓力差如果不超過3℃,可正常使用。
三、影響滅菌效果的因素
(1)水:水溫過高可能會導致預定的真空水平改變,水溫應盡量低。滅菌鍋使用的水應符合應用水質(zhì)量,并且溫度不超過15℃。水的硬度值在0.7~2.0mmoL /L之間。超出該范圍的硬度值可能會引起水垢和腐蝕等問題。從而縮短滅菌鍋的使用壽命,使用的水需經(jīng)過過濾和處理,應保持鍋體清潔。
四、液態(tài)物質(zhì)滅菌要注意
實際工作中常需要對液體滅菌,高壓滅菌鍋說明書中,表明能夠?qū)ζ繝畹囊后w進行滅菌處理,但在實驗中卻遇到了意外的情況:用敞口的玻璃瓶滅菌,其結(jié)果是玻璃瓶中的液體減少了1/3;用塑料薄膜緊緊封住瓶口,封口塑料薄膜中間破裂,玻璃瓶中的液體仍減少1/3。
一.使用中要注意的事項
1.滅菌溫度應是一個溫度范圍,而不是一個固定值
通常,高壓蒸汽滅菌溫度是一個固定值,如,試管斜面培養(yǎng)基和搖瓶液體培養(yǎng)基的滅菌要求為:121℃,20min,但在121℃只是滅菌溫度的下限,實際的滅菌溫度在121℃~124℃(或123℃)之間波動。如果是自動控溫型滅菌鍋,設定好滅菌溫度下限為121℃后,當溫度升到124℃(或123℃)時,自動斷電停止加熱,當溫度降到121℃時,自動開始加熱;如果是手動控溫型滅菌鍋,當溫度升到124℃時,手動切斷電源停止加熱,當溫度降到121℃時,手動接通電源開始加熱。
2 .不同類型高壓蒸汽滅菌鍋對排放冷空氣的不同要求
1)非自動控溫型滅菌鍋多為小型滅菌鍋
對于這類滅菌鍋必須排凈冷空氣,如果不排凈冷空氣,冷空氣熱膨脹后對壓力鍋的工作壓力有所貢獻,此時壓力和溫度不能一一對應,顯示的溫度比鍋內(nèi)的實際工作溫度高,滅菌鍋的工作溫度不能達到設定的殺菌溫度,會影響滅菌效果。
2)自動控溫型滅菌鍋
自動控溫型滅菌鍋通過熱敏電極監(jiān)測鍋內(nèi)溫度變化,顯示屏上顯示的溫度是鍋內(nèi)真實的工作溫度,在冷空氣沒有排凈的情況下,也能夠保證滅菌的溫度要求。由于飽和水蒸汽的滅菌效果最好,所以在使用自動控溫型滅菌鍋時,也應該排放冷空氣,提高滅菌效果,鍋下通常設有排水排氣閥,滅菌時可將排水閥向左(向右為排水)旋轉(zhuǎn)少許,讓少量蒸汽排出,也有的滅菌設備上設有可調(diào)排氣閥,滅菌時,始終保持排氣閥處于微開狀態(tài),可起到排出冷空氣的作用。
二、初次使用的安全檢測很有必要
①手動打開安全閥,看安全閥是否正常;
②加熱升溫過程中,看壓力表指針的上升狀況是否有受阻情況發(fā)生,沒有受阻,可正常使用。
自動控溫型滅菌鍋的簡易安全檢查:
①手動打開安全閥,看安全閥是否正常;
②加水時,觀察水位指示燈是否正常顯示水位狀況;
③在排除冷空氣的前提下, 觀察顯示屏上的溫度和壓力表指示溫度的差,通常情況下,壓力表上的溫度略高于顯示屏上的溫度,此壓力差如果不超過3℃,可正常使用。
三、影響滅菌效果的因素
(1)水:水溫過高可能會導致預定的真空水平改變,水溫應盡量低。滅菌鍋使用的水應符合應用水質(zhì)量,并且溫度不超過15℃。水的硬度值在0.7~2.0mmoL /L之間。超出該范圍的硬度值可能會引起水垢和腐蝕等問題。從而縮短滅菌鍋的使用壽命,使用的水需經(jīng)過過濾和處理,應保持鍋體清潔。
(2)蒸汽的干燥程度滅菌鍋應使用干燥程度不小于0.9的飽和蒸汽,即蒸汽含水量不超過10%,金屬負載狀態(tài)下,干燥程度不小于0.95,以保持溫度與壓力符合線性關系。
(3)滅菌時間滅菌時間是指滅菌過程中滅菌室內(nèi)達到規(guī)定溫度后滅菌所需時間。操作中,應注意觀察蒸汽的進汽速度和壓力, 一般保持壓力和溫度同步上升。
四、液態(tài)物質(zhì)滅菌要注意
實際工作中常需要對液體滅菌,高壓滅菌鍋說明書中,表明能夠?qū)ζ繝畹囊后w進行滅菌處理,但在實驗中卻遇到了意外的情況:用敞口的玻璃瓶滅菌,其結(jié)果是玻璃瓶中的液體減少了1/3;用塑料薄膜緊緊封住瓶口,封口塑料薄膜中間破裂,玻璃瓶中的液體仍減少1/3。
在對液態(tài)物質(zhì)進行滅菌時,當滅菌結(jié)束注意卸壓不能過快,盡量將排氣閥關小,保持自然降壓,保持系統(tǒng)原有的平衡,以防產(chǎn)生液體減少或噴濺現(xiàn)象。
五、小結(jié)