4.1 外觀控制

制備好的培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色，一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無(wú)渾濁、無(wú)沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化，是否蒸發(fā)/脫水。

4.2 污染控制

從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進(jìn)行污染測(cè)試（空白試驗(yàn)），確定無(wú)微生物生長(zhǎng)方可使用。

4.3 性能測(cè)試

4.3.1 測(cè)試菌株選擇： 測(cè)試菌株是具有其代表種的穩(wěn)定特性并能有效證明實(shí)驗(yàn)室特定培養(yǎng)基最佳性能的一套菌株，應(yīng)來(lái)自國(guó)際/國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株或其他有證書(shū)的菌株。

4.3.2 定量測(cè)試方法： 改良Miles-Misra法。測(cè)試菌株過(guò)夜培養(yǎng)物10倍遞增稀釋?zhuān)粶y(cè)試平板和參照平板劃分為4個(gè)區(qū)域并標(biāo)記；從最高稀釋度開(kāi)始，分別滴一滴稀釋液于試驗(yàn)平板和對(duì)照平板標(biāo)記好的區(qū)域；將稀釋液涂滿(mǎn)整個(gè)1/4區(qū)域，37°C培養(yǎng)18小時(shí)；對(duì)易計(jì)數(shù)的區(qū)域計(jì)數(shù)，按公式計(jì)算生長(zhǎng)率（生長(zhǎng)率=待測(cè)培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)/參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù)）。非選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率應(yīng)不低于0.7，該類(lèi)培養(yǎng)基應(yīng)易于目標(biāo)菌生長(zhǎng)；選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率應(yīng)不低于0.1 。

4.3.3 半定量測(cè)試方法：改進(jìn)的劃線(xiàn)法接種法。 平板分ABCD四區(qū)，共劃16條線(xiàn)，平行線(xiàn)大概相隔0.5cm，每條有菌落生長(zhǎng)的劃線(xiàn)記作1分，每個(gè)僅一半的線(xiàn)有菌落生長(zhǎng)記作0.5分，沒(méi)有菌落生長(zhǎng)或生長(zhǎng)量少于劃線(xiàn)的一半記作0分，分?jǐn)?shù)加起來(lái)得到生長(zhǎng)指數(shù)G。目標(biāo)菌在培養(yǎng)基上應(yīng)呈現(xiàn)典型的生長(zhǎng)，而非目標(biāo)菌的生長(zhǎng)應(yīng)部分或完全被抑制，目標(biāo)菌的生長(zhǎng)指數(shù)G大于6時(shí)，培養(yǎng)基可接受 。

4.3.4 定性測(cè)試方法 ：平板接種觀察法。 用接種環(huán)取測(cè)試菌培養(yǎng)物，在測(cè)試培養(yǎng)基表面劃平行直線(xiàn)。按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度對(duì)接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng)，目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)良好生長(zhǎng)，并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài)，非目標(biāo)菌應(yīng)是微弱生長(zhǎng)或無(wú)生長(zhǎng) 。

干粉類(lèi)培養(yǎng)基的檢驗(yàn)報(bào)告單主要包括以下內(nèi)容，建議拿一份CoA結(jié)合本文閱讀。

1. 感官

一般包括色澤、氣味、形態(tài)、雜質(zhì)等，屬于主觀評(píng)價(jià)。不同廠(chǎng)家產(chǎn)品會(huì)有不同。

2.  理化

a) 干燥失重或水分

一般控制在5%-6%以?xún)?nèi)，不同廠(chǎng)家會(huì)有不同。結(jié)合水活度來(lái)說(shuō)，這是控制培養(yǎng)基干粉微生物污染的重要手段。同時(shí)要關(guān)注密封情況，不能破壞水活度的環(huán)境。

b)  凝膠強(qiáng)度

這條僅限于是瓊脂類(lèi)干粉培養(yǎng)基，一般描述為適宜或適中。因?yàn)榄傊�平板一般要倒置培養(yǎng)，所以凝膠強(qiáng)度非常重要。而凝膠強(qiáng)度的高低也直接來(lái)源于瓊脂的質(zhì)量。瓊脂是一種來(lái)源于海藻中，具有自然變異性的生物材料，并不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。主要應(yīng)用于食品和制藥行業(yè)，食品行業(yè)使用量最大，如果凍。細(xì)菌學(xué)瓊脂主要從石花菜中獲取，而目前全球正經(jīng)歷石花菜的短缺。

瓊脂質(zhì)量也用凝膠強(qiáng)度來(lái)評(píng)價(jià)。瓊脂類(lèi)培養(yǎng)基必須達(dá)到規(guī)定的凝膠強(qiáng)度才能實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定倒置培養(yǎng)。如果加入的瓊脂本身的凝膠強(qiáng)度小，加入量就要增加。過(guò)多的加入瓊脂量不僅造成不必要的浪費(fèi)而且會(huì)造成培養(yǎng)基過(guò)硬，直接影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，而且培養(yǎng)基過(guò)硬時(shí)平板劃線(xiàn)容易產(chǎn)生裂痕，所以有時(shí)候并不是你的技術(shù)問(wèn)題。從這個(gè)角度來(lái)說(shuō)就很好理解為什么國(guó)外的一些標(biāo)準(zhǔn)中培養(yǎng)基的瓊脂用量是一個(gè)范圍，如每升培養(yǎng)基的瓊脂含量為12-20g，其實(shí)是根據(jù)所用瓊脂的凝膠強(qiáng)度不同來(lái)決定的。凝膠強(qiáng)度可以用凝膠強(qiáng)度測(cè)定儀直接檢測(cè)。

c)澄清度

溶解之后的澄清度情況，液體培養(yǎng)基尤其要關(guān)注這點(diǎn)。 

d)pH值

滅菌后在25℃的pH測(cè)定值。瓊脂類(lèi)培養(yǎng)基必須采用平頭pH值測(cè)定儀測(cè)定。

3. 微生物

 a)回收率

接菌量在10-100cfu/ml，回收率標(biāo)準(zhǔn)同藥典標(biāo)準(zhǔn)。但是要注意對(duì)照培養(yǎng)基不一定是藥典用的中檢院推廣的對(duì)照培養(yǎng)基。有些國(guó)外生產(chǎn)培養(yǎng)基的對(duì)照培養(yǎng)基只是前一批次合格產(chǎn)品。

b)質(zhì)控菌

菌落特征要符合標(biāo)準(zhǔn)，菌落顏色、大小、其他特征。生長(zhǎng)情況描述為良好或者用+++表示。將質(zhì)控菌稀釋到一定濃度后，使用定量接種環(huán)進(jìn)行四區(qū)劃線(xiàn)后看結(jié)果，第四區(qū)能出現(xiàn)單個(gè)菌落并形態(tài)明顯最好。那+++是不是只代表只生長(zhǎng)到第三區(qū)呢？你可以問(wèn)問(wèn)你的培養(yǎng)基供應(yīng)商。

c）抑菌情況

分為部分抑制，完全抑制。也是用四區(qū)劃線(xiàn)法，一般部分抑制允許在第一區(qū)有部分菌落存在。但是接菌量有區(qū)別，有些是100-1000cfu/ml有些是1000-10000cfu/ml，要注意不同廠(chǎng)家的產(chǎn)品上會(huì)有說(shuō)明。單從抑菌情況來(lái)說(shuō)，如果接菌量越大抑制情況都可以達(dá)到越好，但是要結(jié)合生長(zhǎng)情況考慮，很多抑菌成分如果過(guò)多也會(huì)對(duì)正常生長(zhǎng)的菌產(chǎn)生影響。

如何評(píng)價(jià)一份高質(zhì)量的CoA？

1.  結(jié)果有具體數(shù)字，如水分或干燥失重、pH、回收率、凝膠強(qiáng)度等。

2. 在同樣的培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)情況能達(dá)到四區(qū)劃線(xiàn)都有。

3.  抑制情況是該抑制的都抑制。

4.有配套的MSDS，化學(xué)品安全技術(shù)說(shuō)明書(shū)。

一般的MSDS應(yīng)該包括組分信息、急救措施、消防措施、泄漏應(yīng)急處理、操作處置與儲(chǔ)存、接觸控制和個(gè)體防護(hù)、理化特性、穩(wěn)定性、毒理學(xué)信息、生態(tài)學(xué)信息、廢棄處置等。

從安全操作的角度來(lái)說(shuō)，MSDS告訴你保護(hù)自己和保護(hù)環(huán)境的有用信息。

從穩(wěn)定操作角度來(lái)說(shuō)，MSDS告訴你一瓶開(kāi)蓋干粉培養(yǎng)基可以放置多久。

從廢物處理角度來(lái)說(shuō)，MSDS告訴你大量干粉應(yīng)該如何處置。