一、染色注意事項

1．染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法，不同的染色液染色后的處理是不一樣的。 

2．染色過程中所用的時間要根據染色時的室內溫度、染液的新鮮程度及實驗室的實際情況等靈活掌握。在室溫高、切片、染色液又是新配制的，染色時間就要短，反之時間就長。 

3．伊紅有水溶的和醇溶的，如果用的是水溶的，應該在脫水前進行染色，如果是醇溶的，應使用與溶解伊紅等濃度的酒精開始脫水。 

4．在二甲苯脫蠟之前可以先在60℃烤箱內0.5~1小時，這樣可以使切片粘附更牢固不易脫片，也有利于脫蠟。 

5．二甲苯在HE染色中有脫蠟、透明的作用。二甲苯脫蠟的好壞主要取決于切片在二甲苯內放置的時間和脫蠟時的溫度以及二甲苯的使用次數。染好的切片必須經過透明，有利于顯微鏡觀察，同時并為封片起到了橋梁作用。 

6．用梯度酒精脫水時，在低濃度酒精中時間不宜過長，到高濃度時逐步延長脫水時間。以免脫水不徹底，影響二甲苯透明的效果。 

7．在酸性分化液內停留的時間不要過長，分化不可過度，避免使細胞核內該染上色的結構脫色。不需分化處理的蘇木精染色時要注意掌握染色時間，以防止組織切片染色背景過深或細胞核、胞質染色不足。
二、取材注意事項

1）取材動作要迅速，不宜作太久的拖延以免組織細胞的成分、結構等發生變化。

2）切片材料應根據需要觀察的部位進行選擇，盡可能不要損傷所需要的部分。 
三、固定注意事項

（1）一般固定液，都以新配為好，配好后應貯存在陰涼處，不宜放在日光下，以免引起化學變化，失去固定作用。 

（2）有些混合固定液的成份之間會發生氧化還原作用，一定要在使用前才混合，如果混合太早，固定時就沒有作用了。 

（3）固定材料時，固定液必須充足，一般為材料塊的20~30倍，有些水分多的材料，中間應更換1-2次新液。 

（4）材料固定完畢后，保存于嚴密緊塞或加蓋的容器里，同時在容器外上標簽，并隨同材料在溶液中投入相應的標簽，以免相互混淆。標簽上注明固定液、材料來源、日期等。標簽上的文字，應用黑色鉛筆或繪圖黑墨水書寫。 

四、 脫水注意事項

（1）脫水必須在有蓋的玻璃品中進行，防止吸收空氣中的水分和酒精揮發。 

（2）在更換高一級的脫水劑時，最好不要移動材料以免損壞，可用吸管吸出器皿中的脫水劑，再用吸水器吸盡皿內剩余液，然后于皿中加入高一級脫水劑。 

（3）在低濃度酒精中，每級停留不宜太長，否則易使組織變軟，助長材料的解體。 

（4）在高濃度或純酒精中，每級停留的時間也不宜太長，否則會使組織變脆，影響切片。 

（5）如需過夜，應停留在75%酒精中。 

（6）脫水必須徹底，否則不易透明，甚至使透明劑內出現白色混濁現象。
五、透明注意事項

（1）使用透明劑時，要隨時蓋緊蓋子，以免空氣中的水分進入和透明劑的揮發。 

（2）更換每級透明劑，動作要迅速，一方面為了不使材料塊干涸，另一方面能避免吸收濕氣。 

（3）在透明過程中，如果材料周圍出現白色霧狀，說明材料中的水未被脫凈，應退回純酒精中重新脫水，然后再透明。
六、透蠟注意事項  

（1）盡量保持在較低溫度中進行，以石蠟不凝固為度。

（2）透蠟溫度要恒定，不可忽高忽低。 

（3）操作要迅速，力求在最短的時間內完成石蠟透入過程，以免引起組織變硬、變脆、收縮等。