穩(wěn)定性試驗(yàn)貫穿于產(chǎn)品的全生命周期之中。在工藝開發(fā)階段，小試產(chǎn)品的穩(wěn)定性探索可以為后續(xù)中試產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究做預(yù)判；在新藥注冊申報(bào)時(shí)，需要完成穩(wěn)定性試驗(yàn)（長期穩(wěn)定性試驗(yàn)、臨床使用穩(wěn)定性試驗(yàn)、反復(fù)凍融穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性等），以指導(dǎo)在臨床試驗(yàn)階段試驗(yàn)用藥的存儲(chǔ)及使用；藥品上市后，雖然產(chǎn)品沒有發(fā)生變化，但每年也必須要做持續(xù)穩(wěn)定性考察。

每個(gè)產(chǎn)品都有其獨(dú)特的工藝，針對不同的產(chǎn)品最好要有與之對應(yīng)的單個(gè)方案。方案一般包含以下幾個(gè)方面：樣品、考察條件、試驗(yàn)周期、檢測項(xiàng)目、檢測方法、接受標(biāo)準(zhǔn)等。方案在起草后，應(yīng)經(jīng)過審核、批準(zhǔn)后執(zhí)行。

生物制品穩(wěn)定性試驗(yàn)一般包括長期穩(wěn)定性試驗(yàn)、加速穩(wěn)定性試驗(yàn)、強(qiáng)制試驗(yàn)（也稱影響因素試驗(yàn)，屬于穩(wěn)定性試驗(yàn)的探索）。長期穩(wěn)定性試驗(yàn)一般是在推薦的貯藏條件下進(jìn)行的，其可以作為制定產(chǎn)品儲(chǔ)存條件和有效期的重要依據(jù)。加速穩(wěn)定性試驗(yàn)一般是在長期與強(qiáng)制試驗(yàn)條件之間進(jìn)行的，其目的在于評(píng)估運(yùn)輸和存儲(chǔ)過程中條件的短期偏離對產(chǎn)品的影響（包括生物降解或物理變化等）。強(qiáng)制試驗(yàn)一般是在更惡劣、更極端的環(huán)境下進(jìn)行，其目的在于評(píng)估產(chǎn)品的降解途徑、破壞程度，也被用來評(píng)價(jià)產(chǎn)品雜質(zhì)（降解產(chǎn)物）分析方法的有效性。

以下分內(nèi)容進(jìn)行說明穩(wěn)定性試驗(yàn)具體包括哪些，應(yīng)該怎么做。

1、樣品

在《生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》中，對其就有詳細(xì)的說明“研究樣品通常包括原液、成品、中間產(chǎn)物及產(chǎn)品自帶的稀釋液或是重懸液。凡涉及到不連續(xù)操作的生產(chǎn)工藝步驟，其中間產(chǎn)物需要嚴(yán)格的貯存操作的均需要進(jìn)行相應(yīng)的穩(wěn)定性研究，以證明該貯存操作不會(huì)影響到后續(xù)工藝產(chǎn)品的質(zhì)量。”

在長期穩(wěn)定性試驗(yàn)及加速穩(wěn)定性試驗(yàn)中，研究批次要求為3批中試規(guī)模生產(chǎn)，當(dāng)然有商業(yè)化規(guī)模的更好。在《生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》要求“研究樣品的生產(chǎn)工藝與質(zhì)量應(yīng)一致（即具有代表性），批量應(yīng)滿足穩(wěn)定性研究的需要。研究用制劑產(chǎn)品應(yīng)為來源自不同原液批次的質(zhì)量檢驗(yàn)后的合格批次。穩(wěn)定性研究樣品應(yīng)采用與實(shí)際貯存過程中相同的包裝容器與密閉系統(tǒng)進(jìn)行研究；原液或中間產(chǎn)物樣品可以采用與實(shí)際應(yīng)用中相同材質(zhì)或材料的容器和密封系統(tǒng)開展研究。”這些要求在ICH Q1中也被提及。強(qiáng)制試驗(yàn)研究中，要求為1批中試規(guī)模生產(chǎn)的批次，看試驗(yàn)?zāi)康模�選擇合適的包裝材料。

2、考察條件

考察條件的設(shè)置和研究時(shí)間的范圍要充分考慮藥品未來的貯藏、運(yùn)輸及其使用的整個(gè)過程。試驗(yàn)條件一般考慮：溫度、濕度、光照、震動(dòng)、氧化、酸堿和反復(fù)凍融等。

2.1、溫度。溫度設(shè)置的總原則為：長期穩(wěn)定性試驗(yàn)的溫度條件應(yīng)與實(shí)際保存條件一致；強(qiáng)制穩(wěn)定性試驗(yàn)的溫度設(shè)置一般應(yīng)達(dá)到樣品發(fā)生降解超出質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；加速穩(wěn)定性試驗(yàn)的溫度設(shè)置在兩者之間。

另外，我們還可以參考ICH Q1A上的一些建議。

① 長期穩(wěn)定性試驗(yàn)。對于普通存儲(chǔ)條件的產(chǎn)品來說：25℃±2℃和/或30℃±2℃

（如果要想藥品在全國各地進(jìn)行銷售，建議大家做30℃±2℃）；對于擬冷藏的產(chǎn)品來說：5℃±3℃；對于冷凍貯藏的產(chǎn)品來說：-20℃±5℃；對于-20℃以下貯藏的，應(yīng)酌情處理。

② 加速穩(wěn)定性試驗(yàn)。對普通存儲(chǔ)條件的產(chǎn)品來說，試驗(yàn)條件為40℃±2℃；對于

擬冷藏的產(chǎn)品來說：25℃±2℃；對于冷凍貯藏的產(chǎn)品來說：應(yīng)在略高的溫度（如：5℃±3℃或25℃±2℃）下放置適當(dāng)?shù)臅r(shí)間進(jìn)行試驗(yàn)，以考察如果短期偏離標(biāo)簽要求的貯藏條件對藥品的影響；對于-20℃以下貯藏的，限制每次取樣后的檢測時(shí)間，相當(dāng)于進(jìn)行了加速。

③ 強(qiáng)制穩(wěn)定性試驗(yàn)。對普通存儲(chǔ)條件的產(chǎn)品來說，試驗(yàn)條件一般高于加速試驗(yàn)

溫度10℃以上（如50℃、60℃等）；對于擬冷藏的產(chǎn)品來說：原則上是酌情處理，建議30±2℃；對于冷凍貯藏的產(chǎn)品來說：建議在25℃±2℃或者30±2℃下進(jìn)行；對于-20℃以下貯藏的，可以不進(jìn)行強(qiáng)制試驗(yàn)。

2.2、濕度。在《生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》要求“對能證明包裝容器與密封系統(tǒng)具有良好的密封性能，則不同濕度條件下的穩(wěn)定性研究可以省略；否則，需要開展相關(guān)研究。”

另外，我們還可以參考ICH Q1A上的一些建議，這里就不詳細(xì)舉例了。不過，要特別注意的一點(diǎn)是“對于包裝在半滲透容器（軟袋、塑料）中的水溶液制劑，如果是玻璃的基本可以不考慮。除物理、化學(xué)、生物和微生物穩(wěn)定性考察外，應(yīng)考察潛在的失水性。”特別在北方（干燥的環(huán)境下），這種考察可在低相對濕度條件下進(jìn)行，以證明其可以放在低相對濕度的環(huán)境中。

2.3、光照、震動(dòng)、氧化、酸堿條件等研究應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的貯存條件和研究目的進(jìn)行設(shè)計(jì)。光照的設(shè)計(jì)可以參考《ICH Q1B 穩(wěn)定性試驗(yàn)：新原料藥和制劑的光穩(wěn)定性試驗(yàn)》。

2.4、反復(fù)凍融。對于冷凍保存的原液、中間產(chǎn)物或成品，應(yīng)考察凍融的次數(shù)及凍融條件對產(chǎn)品質(zhì)量的影響。這樣不僅可以指導(dǎo)原液、中間產(chǎn)物后續(xù)的制備過程，也可以為成品使用過程中凍融次數(shù)的規(guī)定做確認(rèn)。

3、試驗(yàn)周期

如果事先對樣品的存儲(chǔ)時(shí)間不確定，建議在試驗(yàn)前期可以每個(gè)月測定一次或有選擇性的增加檢測時(shí)間點(diǎn)，有了數(shù)據(jù)積累的經(jīng)驗(yàn)后，可以按照《生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》中的要求“長期穩(wěn)定性研究時(shí)間的一般原則是，第一年內(nèi)每隔三個(gè)月檢測一次，第二年內(nèi)每隔六個(gè)月檢測一次，第三年開始可以每年檢測一次。如果有效期（保存期）為一年或一年以內(nèi)，則長期穩(wěn)定性研究應(yīng)為前三個(gè)月每月檢測一次，以后每三個(gè)月一次。在某些特殊情況下，可靈活調(diào)整檢測時(shí)間，比如，基于初步穩(wěn)定性研究結(jié)果，可有針對性的對產(chǎn)品變化劇烈的時(shí)間段進(jìn)行更密集的檢測。原則上，長期穩(wěn)定性研究的總體時(shí)間應(yīng)在擬定有效期的基礎(chǔ)上延長至少六個(gè)月。強(qiáng)制或加速穩(wěn)定性研究時(shí)間應(yīng)觀察到產(chǎn)品發(fā)生明顯、變化或不合格。”

另外，還應(yīng)規(guī)定取樣的時(shí)間，不建議提前取樣，但可以推遲取樣，不過要規(guī)定最多可以推遲的天數(shù)（特別關(guān)注上市后的持續(xù)性穩(wěn)定性考察，不要推后太久，以免造成由于檢測發(fā)現(xiàn)不合格再召回過程中已有患者使用的風(fēng)險(xiǎn)）。穩(wěn)定性試驗(yàn)試驗(yàn)周期確定后，應(yīng)提前通知取樣人員及QC人員提前做好準(zhǔn)備，包括檢測設(shè)備是否在劑量有效期范圍內(nèi)，檢測試劑和人員是否充足，會(huì)不會(huì)造成不同項(xiàng)目的堆積等等。

4、檢測項(xiàng)目

穩(wěn)定性試驗(yàn)的檢測項(xiàng)目應(yīng)涵蓋那些在貯藏期間易變化的、可能影響產(chǎn)品質(zhì)量（安全性、有效性）的內(nèi)容。以下可做參考：

① 物理化學(xué)：外觀（顏色和澄清度），溶液、粉末或凍干粉溶解后的可見異物、

不溶性微粒，pH值、滲透壓，粉末劑和凍干制劑的水分，液體劑型的裝量等。

② 鑒別：終產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)確認(rèn)。

③ 含量：蛋白質(zhì)含量、添加劑(如穩(wěn)定劑、防腐劑)或賦形劑含量等。

④ 生物學(xué)活性：效價(jià)。在《ICH Q5C：生物技術(shù)生物制品質(zhì)量：生物

技術(shù)/生物制品穩(wěn)定性試驗(yàn)》中指出“應(yīng)規(guī)定效價(jià)研究的合理間隔期，其結(jié)果應(yīng)以校準(zhǔn)的生物活性單位表示，如有可能，生物活性單位應(yīng)用國家或國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行標(biāo)化。如尚未建立相應(yīng)的國家或國際標(biāo)準(zhǔn)品，測定結(jié)果可用經(jīng)特性鑒定的內(nèi)部參比物質(zhì)的單位表示。”；另外，在《生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》中還指出“同時(shí)，需根據(jù)產(chǎn)品自身的特點(diǎn)考慮體內(nèi)生物學(xué)活性、體外生物學(xué)活性或其他替代方法的研究”。

⑤ 降解產(chǎn)物：不僅要考慮到產(chǎn)品的降解還應(yīng)考慮添加劑（如穩(wěn)定劑、防腐劑或

輔料發(fā)生的降解。

⑥ 微生物學(xué)：無菌、支原體等。

檢測項(xiàng)目并不需要在穩(wěn)定性試驗(yàn)的每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)都進(jìn)行檢測；一些檢測項(xiàng)目（例如：產(chǎn)品鑒別有關(guān)的、無菌、支原體等）經(jīng)過評(píng)估后認(rèn)為不會(huì)隨著時(shí)間發(fā)生而改變的，可以僅在試驗(yàn)的第0個(gè)月、最后一個(gè)月和申報(bào)點(diǎn)，進(jìn)行檢測。

5、檢測方法

在工藝開發(fā)的早期，分析方法的開發(fā)應(yīng)該同步進(jìn)行；小試確認(rèn)后，可以先用小試產(chǎn)品對分析方法做基本的確認(rèn)，中試產(chǎn)品后，需要對分析方法做驗(yàn)證。分析方法的驗(yàn)證包括：準(zhǔn)確度、專屬性、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、范圍和耐用性。一般做穩(wěn)定性試驗(yàn)時(shí)，為了保證檢測結(jié)果的可靠性，會(huì)要求分析方法需要經(jīng)過驗(yàn)證；如果方法沒有經(jīng)過驗(yàn)證，也可以先做，隨后開展全面的驗(yàn)證，只不過，假使方法經(jīng)驗(yàn)證后需要變更，那么就需要根據(jù)變化情況重新選擇幾個(gè)批次穩(wěn)定性試驗(yàn)。除此之外，當(dāng)發(fā)生新/老藥典的升級(jí)變更時(shí)，也需要同時(shí)對比兩種方法下的產(chǎn)品質(zhì)量結(jié)果是否一致，也可以取出另外一批樣品進(jìn)行檢測考察趨勢是否一致，如果兩種檢測方法的質(zhì)量結(jié)果和檢測結(jié)果趨勢都較為一致，則可以直接替換為新藥典方法來做。

6、接受標(biāo)準(zhǔn)

接受標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)與貨架期標(biāo)準(zhǔn)（質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)）一致，而非放行標(biāo)準(zhǔn)。

以上就是穩(wěn)定性試驗(yàn)的基本內(nèi)容，除此之外，大家還可以參考以下的法規(guī)來逐漸完善對產(chǎn)品穩(wěn)定性試驗(yàn)的認(rèn)知。

《ICH Q1A（R2）：新原料藥和制劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)》、《ICH Q1B：穩(wěn)定性試驗(yàn)：新原料藥和制劑的光穩(wěn)定性試驗(yàn)》、《ICH Q1C：新劑型的穩(wěn)定性試驗(yàn)（指的是相對于已經(jīng)申報(bào)的劑型）》、《ICH Q1D：新原料藥和制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)的括號(hào)法和矩陣法設(shè)計(jì)》、《ICH Q1E：穩(wěn)定性數(shù)據(jù)的評(píng)價(jià)》、《ICH Q1F：第三和第四氣候帶的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)注冊要求》（已經(jīng)被撤回，僅做參考）、《ICH Q5C 生物技術(shù)生物制品質(zhì)量：生物技術(shù)/生物制品穩(wěn)定性試驗(yàn)》、《生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》、《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010 年修訂）》-第十章質(zhì)量控制與質(zhì)量保證第三節(jié)持續(xù)穩(wěn)定性考察。