1.沉降菌原理
通過自然沉降,收集在空氣中的生物粒子于培養基平皿中,在適宜的溫濕度條件下,培養一定時間,讓其繁殖到可見菌落進行計數,通過計數培養皿中的菌落數,來判定潔凈環境中活的微生物數,并以此來評定潔凈區域的潔凈度。
2.人員要求
測試人員應經過微生物相關培訓后,取得潔凈區域負責人同意后進入檢測。
3.檢測用培養皿
一般采用直徑φ90mm玻璃平板,經滅菌后,在無菌操作下,注入冷卻至60℃左右的胰酪大豆胨瓊脂培養基(TSA)或沙氏葡萄糖瓊脂培養基(SDA)或經驗證過的培養基。加蓋凝固(倒平板過程中手要穩,防止手抖造成培養基灑落;移動平板過程中動作要輕緩,防止動作過大,造成平板傾灑和摔落)。
4.檢測過程
4.1凝固后的培養皿須通過傳遞窗傳入潔凈區域,傳入前需嚴格消毒。
4.2根據規程中規定的布點圖,將標記好的培養皿逐一放置,然后從里到外打開平皿蓋,使培養基便面最大程度的暴露在環境中。
4.3靜態測試:從里到外打開平皿蓋,操作人員接著退出潔凈區域,通過計時,保證打開平皿蓋的培養皿在環境中暴露30min,這段時間內,禁止人員進出。
4.4動態測試:從里到外打開平皿蓋,操作人員在潔凈區域內正常工作,通過計時,保證打開平皿蓋的培養皿在環境中暴露4h(不夠4h,按照4h進行換算),這段時間內,操作人員正常進出潔凈區域。
4.5采樣結束后,將培養基倒置于恒溫培養箱中培養。胰酪大豆胨瓊脂培養基(TSA)置于30-35℃培養箱內培養3-5天;沙氏葡萄糖瓊脂培養基(SDA)置于20-25℃培養箱內培養5-7天。
5.菌落計數
5.1觀察培養皿中的菌落數,并計數,對于不明顯菌落,可用5-10倍放大鏡檢查,是否遺漏。
5.2若平板有2個或多個菌落重疊,可分辨,仍以2個或多個菌落數進行計數。
來源:參考《中國藥典》,封面圖來源創可貼會員,藥物微生物檢驗小編整理。