傾注融化后的培養基到平皿中,使之在乎皿中形成一個至少3mm厚度的瓊脂層(直經90mm的平皿通常要加入18mL-20mL瓊脂培養基),或根據相關標準要求制備平皿。將平皿蓋好皿蓋后放置在水平平面使指冷卻凝固。如果平板要儲存、培養時間超過48h或培養溫度超過40℃,要增加培養基的傾注量。
注:在培養過程中,瓊脂培養基會損失水分,在某些環境條件下會影響微生物的生長。,造成培養基水分損失的因素很多,如培養基的成分、平皿中培養基的量、培養箱的類型(如使用帶風扇的培養箱)、培養箱里的空氣濕度、平皿在培養箱中放置的位置和數量以及培養溫度等。
凝固后的培養基應立即使用或存放在防止其成分發生變化的條件下,如存放于暗處和(或)5℃±3℃冰箱的密封袋中。在平板的底部或側面做好標記,標記的內容包括培養基名稱、制備日期和(或)有效期,也可使用適宜的培養基編碼系統進行標記。
將傾注好的平板放在密封袋中冷蔵可延長儲存期限。為了避免冷凝水的產生,平板應冷卻后再裝入密封袋中。貯存前不要對培養基表面進行干燥處理。
對于采用表面接種的固體培養基,應先對瓊脂表面進行干燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣于烘箱/培養箱中(溫度設置為25℃~50℃);或放在有對流風的無菌凈化臺中,直到培養基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。商業化的平板脂培養基應按照廠商提供的說明使用。