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分光光度計知識匯總(6)

放大字體  縮小字體 發布日期:2023-11-22
核心提示: 4.2 定量方法紫外可見分光光度分析的定量依據是光吸收定律,但具體操作方法卻有多種4.2.1 標準曲線法即工作曲線
 4.2 定量方法

紫外可見分光光度分析的定量依據是光吸收定律,但具體操作方法卻有多種

4.2.1 標準曲線
即工作曲線法,適用于大量重復的樣品分析,是工廠控制分析中應用最多的方法。
根據光吸收定律,對于一種有色化合物,ε是一個定值,若把光程L也固定,那么吸光度A就和溶液的濃度c成正比,也就是說吸光度A和濃度c呈線性關系。
配制一系列適當濃度的標準溶液,顯色后分別測定其吸光度,把吸光度A對濃度c作圖,即得工作曲線。

4.2.2 直接比較法

直接比較法其實質也是工作曲線法,是一種簡化的工作曲線法。
配一個已知被測組分濃度為cs的標樣,測其吸光度為As,在同樣條件下再測未知樣品的吸光度為Ax,通過計算可求出未知樣品的濃度cx。
As=εcsL
Ax=εcxL
由于溶液性質相同,比色皿厚度一樣,所以As/Ax=cs/cx
式中:
cs-已知被測組分的濃度,mol/L;
cx-未知樣品的濃度,mol/L;
As-已知被測組分的吸光度;
Ax-未知樣品的吸光度。
直接比較法簡化了繪制工作曲線的步驟,適用于個別樣品的測定。
操作時應注意配制標樣的濃度要接近被測樣品的濃度,這樣能減少測量誤差。

4.2.3 標準加入法

標準加入法是工作曲線的一種特殊應用。
選擇適當的顯色條件,先測定濃度為cx的未知樣品吸光度為Ax,再向未知樣品中加入一定量的標樣,配置成濃度為cx+Δc1、cx+Δc2……一系列樣品,分別顯色后再測定吸光度為A1、A2……最后在坐標紙上繪圖,以吸光度A為縱坐標,以濃度c為橫坐標,分別畫出Δc1、Δc2所對應的A1、A2等各點,連成直線后延長,與橫軸的交點cx也就是未知樣品的濃度cs。
應用標準加入法時要注意,加入的標樣濃度要適當,使畫出的曲線保持適當角度,濃度過大或過小都會帶來測量誤差。
這種方法操作比較麻煩,不適于作系列樣品分析,但它適用于組成比較復雜,干擾因素較多而又不太清楚的樣品,因為它能消除背景的影響。

編輯:songjiajie2010

 
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