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滅菌后小倒管內留有氣泡原因及解決辦法

放大字體  縮小字體 發布日期:2012-09-24  來源:北京陸橋技術有限責任公司
核心提示:滅菌后小倒管內留有氣泡原因及解決辦法
 
大腸菌群、大腸桿菌檢測時,所用培養基LST、BGLB、EC肉湯等這些需要用小倒管(杜氏管)考察產氣的培養基,滅菌后,偶爾會有小氣泡留在小倒管內,導致培養基不能使用。重復滅菌不僅費時,更重要的是會破壞培養基的有效成分。為了避免這類問題的發生,我公司實驗室根據實驗經驗,做出以下幾種可能原因分析:

原因一:高溫高壓滅菌鍋工作壓力不夠,使氣體不能完全排出
高壓鍋在滅菌過程中產生的最大壓力不夠,不能將小倒管內的氣體擠出,導致滅菌后任留有小氣泡。此外,高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達不到滅菌溫度,也會出現類似現象。
解決辦法:使用檢查滅菌效果的用品-壓力蒸汽滅菌指示卡,對高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進行監測。

原因二:試管塞塞得太緊
在滅菌時,試管塞塞得太緊(有些硅膠塞與試管不配套)會導致試管內壓力與滅菌鍋內壓力不一致。當滅菌鍋升溫升壓時,鍋內壓力會大于試管內壓力,試管內壓力不夠,不能將小倒管內氣體排盡,就留有氣泡;當滅菌鍋降溫降壓時,鍋內壓力小于管內壓力,可能會使試管塞和培養基崩出,培養基報廢。
解決辦法:改用塑料帽、不銹鋼管帽,或者與試管相匹配的硅膠塞。

原因三:小倒管口太小
小倒管在加熱加壓后,一方面液體培養基要進入小倒管,另一方面小倒管內部的空氣要被排出,如果小倒管管口太小,液體不容易進去,里面的空氣不容易被排出,就會導致有小氣泡生成。
解決辦法:改用開口比較大的倒管。
 
以上提供幾種可能形成氣泡的主要原因,還有幾點建議:
1.可以在高壓鍋壓力降下來后,溫度不太高的時候將培養基從鍋中拿出,迅速放在冷水中,急冷,注意要使冷水高度超過試管中液面高度。利用熱脹冷縮的原理,可以使小倒管中氣泡排出。
2.若使用非全自動高溫高壓滅菌鍋(此類鍋一般需要在100℃手動關閉放氣閥),則不要在鍋剛達到100℃時就關閉放氣閥,可以讓高壓鍋在100℃時多排一會兒熱氣,這樣有助于小倒管中氣體排出。
此外,盡量不要采用將滅菌后的試管顛倒或大角度傾斜的方式,使小倒管內氣體排出。此種方法可能會導致培養基通過試管口或試管塞受到污染,或者導致試管內液體流出。

編輯:songjiajie2010

 
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關鍵詞: 小倒管 氣泡
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