在實驗室中,將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上,或活的生物體內的過程叫做接種。
常用的微生物實驗室接種方法有以下幾種:
1)液體接種 從固體培養基中將菌洗下,倒入液體培養基中,或者從液體培養物中,用移液管將菌液接至液體培養基中,或從液體培養物中將菌液移至固體培養基中,都可稱為液體接種。
2)穿刺接種 在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常采用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針,用的培養基一般是半固體培養基。它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。
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3)活體接種 活體接種是專門用于培養病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種于活的生物體內才能生長繁殖。所用的活體可以是整個動物;也可以是某個離體活組織,例如猴腎等;也可以是發育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養。
4)澆混接種 該法是將待接的微生物先放入培養皿中,然后再倒入冷卻至45°C左右的固體培養基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之后,置合適溫度下培養,就可長出單個的微生物菌落。
5)劃線接種 這是最常用的接種方法。即在固體培養基表面作來回直線形的移動,就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環,接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。
6)涂布接種 與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然后再將菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布,讓菌液均勻分布,就可長出單個的微生物的菌落。
7)三點接種在研究霉菌形態時常用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點,讓它各自獨立形成菌落后,來觀察、研究它們的形態。除三點外,也有一點或多點進行接種的。
8)注射接種 該法是用注射的方法將待接的微生物轉接至活的生物體內,如人或其它動物中,常見的疫苗預防接種,就是用注射接種,接入人體,來預防某些疾病。在實驗室,用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面要將菌液均勻涂布時,需要用到涂布棒。
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進行接種時,應當注意什么呢?
1. 接種細菌時必須穿工作服、工作帽。
2. 進行接種食品樣品時,必須穿專用的工作服、帽及拖鞋,應放在無菌室緩沖間工作前經紫外線消毒后使用。
3. 接種食品樣品時,應在進無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球將手擦干凈。
4. 進行接種所用的吸管,平皿及培養基等必須經消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次后使用。
5. 從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊。
6. 接種樣品,轉種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。
7. 接種環和針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到環和針與桿的連接處,接種結核菌和烈性菌的接種環應在沸水中煮沸5min,再經火焰燒灼。
8. 吸管吸取菌液或樣品時,應用相應的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。
9. 處理和接種食品標本時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。
常用的微生物實驗室接種方法有以下幾種:
1)液體接種 從固體培養基中將菌洗下,倒入液體培養基中,或者從液體培養物中,用移液管將菌液接至液體培養基中,或從液體培養物中將菌液移至固體培養基中,都可稱為液體接種。
2)穿刺接種 在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常采用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針,用的培養基一般是半固體培養基。它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。
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3)活體接種 活體接種是專門用于培養病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種于活的生物體內才能生長繁殖。所用的活體可以是整個動物;也可以是某個離體活組織,例如猴腎等;也可以是發育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養。
4)澆混接種 該法是將待接的微生物先放入培養皿中,然后再倒入冷卻至45°C左右的固體培養基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之后,置合適溫度下培養,就可長出單個的微生物菌落。
5)劃線接種 這是最常用的接種方法。即在固體培養基表面作來回直線形的移動,就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環,接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。
6)涂布接種 與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然后再將菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布,讓菌液均勻分布,就可長出單個的微生物的菌落。
7)三點接種在研究霉菌形態時常用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點,讓它各自獨立形成菌落后,來觀察、研究它們的形態。除三點外,也有一點或多點進行接種的。
8)注射接種 該法是用注射的方法將待接的微生物轉接至活的生物體內,如人或其它動物中,常見的疫苗預防接種,就是用注射接種,接入人體,來預防某些疾病。在實驗室,用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面要將菌液均勻涂布時,需要用到涂布棒。
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進行接種時,應當注意什么呢?
1. 接種細菌時必須穿工作服、工作帽。
2. 進行接種食品樣品時,必須穿專用的工作服、帽及拖鞋,應放在無菌室緩沖間工作前經紫外線消毒后使用。
3. 接種食品樣品時,應在進無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球將手擦干凈。
4. 進行接種所用的吸管,平皿及培養基等必須經消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次后使用。
5. 從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊。
6. 接種樣品,轉種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。
7. 接種環和針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到環和針與桿的連接處,接種結核菌和烈性菌的接種環應在沸水中煮沸5min,再經火焰燒灼。
8. 吸管吸取菌液或樣品時,應用相應的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。
9. 處理和接種食品標本時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。