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微生物無菌操作的幾個注意事項!

放大字體  縮小字體 發布日期:2023-01-10
核心提示:無菌技術主要包括1、對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進行清潔和消毒; 2、將用于微生物培養的器皿、接種的用具和培養基

無菌技術主要包括

1、對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進行清潔和消毒; 

2、將用于微生物培養的器皿、接種的用具和培養基等進行滅菌; 

3、為避免周圍環境中微生物的污染,實驗操作應在酒精燈火焰附近進行,

4、實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸

 


一、倒平板

 

 

1.培養基滅菌后,需冷卻至50℃左右時才能倒平板。

2.左手拿培養皿,右手拿錐形瓶,左手拇指和食指將培養皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,不要完全打開。

3.整個操作在酒精燈火焰旁進行,避免雜菌污染。

4.平板冷卻后要倒置的原因:防止皿蓋上的冷凝水落入培養基,造成污染。

5.若倒平板時,培養基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板應丟棄。

 

 

 

二、平板劃線操作

 

第一次劃線及每次劃線之前都要灼燒滅菌,劃線操作結束仍需灼燒接種環,每次灼燒目的總結如下表:

 

1、將接種環放在火焰上灼燒,直到接種環燒紅;2、在火焰旁冷卻接種環,并打開盛有菌液的試管的棉塞;

3、將試管口通過火焰;4、將已冷卻的接種環伸入菌液中,沾取一環菌液;

4、將試管口通過火焰,并塞上棉塞;6、左手將皿蓋打開條縫隙,右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內,劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。注意不要劃破培養基。

7、灼燒接種環,待其冷卻后,從第一區域劃線的末端開始往第二區域內劃線。重復以上操作,在三區域內劃線。注意不要將最后一-區域的劃線與第一-區相連。8、將平板倒置,放入培養箱中培養。

 

 

三、稀釋涂布平板

 

1.稀釋操作時:

每支試管及其中9mL水、移液管均需滅菌;操作時,試管口和移液管應在離火焰1-2cm處。

 

2.涂布平板時:

①涂布器用70%酒精消毒,取出時,多余酒精在燒杯中滴盡,沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃。

②不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中,以免引燃其中的酒精。

③酒精燈與培養皿距離要合適,移液管頭不要接觸任何物體。

 

 

 

 

三、擺斜面

 

裝在試管中的瓊脂培養基,在滅菌完成后,趁熱立即擺放在木棒(或玻璃棒)上,并成適當的斜度,冷卻后,瓊脂凝固即成斜面。斜面長度不用超過試管二分之一。

 

編輯:songjiajie2010

 
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