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菌株保存方法

放大字體  縮小字體 發布日期:2023-06-25
核心提示: 1.斜面低溫保存法將分純的待存菌接種于適宜的固體斜面培養基上,得到充分生長后,用封口膜封口,貼上標簽,保存于4℃的冰箱
 1.斜面低溫保存法

將分純的待存菌接種于適宜的固體斜面培養基上,得到充分生長后,用封口膜封口,貼上標簽,保存于4℃的冰箱中。此法操作簡單、使用方便、不需要特殊設備,是實驗室菌種保存最常用的方法。但保存時間短,一般每個月都要移種1次,而且菌種容易變異,所以此方法只適合實驗室短期實驗菌株的保存。

 

2.半固體瓊脂法 

用接種針將以分純的待存菌,穿刺接種于半固體中,放入培養箱培養后出,封上無菌的液體石蠟,貼上標簽,放4℃冰箱保存。此方法簡便易操作,不需特殊設備、技術難度不大,但保存的時間不長,一般只能保存1年以內,而且對抵抗力弱以及一些特殊菌種大概只能存活3~6個月,需要頻繁的傳代,這樣很容易使菌株受到污染、變異。所以此方法不適用菌種的長期保存,只適合實驗室一些要求不高的菌種的短期保存。

 

3.液體石蠟保存法 

將液體石蠟滅菌,放于37℃恒溫箱中,使水汽蒸發掉備用。再將已分純的待存菌 在最適宜的斜面培養基中培養,使得到健壯的菌體,用無菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟,注入已長好的斜面培養基上,用量以高出斜面1cm為準,將試管直立,貼上標簽,置4℃下保存。此法制作簡單,不需要特殊設備,菌種可以保存1年左右不需要經常移種,缺點是保存的時候需要直立放置。此方法適合實驗室短期保存,而且保存時需要一定的空間。

 

4.高層半固體瓊脂石蠟保存法

將待存菌經平板劃線分離后,挑單個菌落用接種針反復穿刺接種到高固體瓊脂培養基中,經培養箱培養后取出,用滅菌過的液體石蠟滴加到半固體瓊菌種管表層約0.5cm高度,貼上標簽,存放4℃冰箱。此法操作簡便,不需要特殊設備,效果好,可以保存菌株1~2年。所以適合實驗室菌株的較長期的保存。

 

5.紙片法 

將已分純的待存菌用無菌鑷子鑷取紙片,在紙片上刮取4~5個菌落,入凍存管內,蓋上蓋子后用封口膠布封住邊緣,貼上標簽,放入冰箱冷凍保存(-20℃左右)。此方法具有操作簡單、不需特殊設備、經濟實用、保存空間小等而且保存時間至少2年,但對一些營養要求比較高的菌種,存活率不理想。所以方法適合實驗室一些營養要求不高的菌種較長時間的保存。

 

6.甘油液保存法

將已分純的待存菌接種于肉湯中,37℃培養18~24h,然后按5份肉湯溶液、2份甘油-生理鹽水保存液的比例分裝于滅菌的微量離心管或細胞凍存管中,貼上標簽,置-80℃~-20℃冰箱保存。此法操作簡便,不需要特殊設備,效果好,可以保存菌種3年左右,無變異現象,而且此方法還可以保存一些要求較高的特殊菌種,適用范圍廣。所以此方法適合實驗室普通菌種或特殊菌種的較長期的保存。

編輯:songjiajie2010

 
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