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色譜流出曲線和術語

放大字體  縮小字體 發布日期:2005-10-07

.色譜流出曲線

    在色譜法中,當樣品加入后,樣品中各組分隨著流動相的不斷向前移動而在兩相間反復進行溶解、揮發,或 吸附、解吸的過程。如果各組分在固定相中的分配系數(表示溶解或吸附的能力)不同,就有可能達到分離。

分配系數小的組分滯留在固定相中的時間短,在柱內移動的速度快,先流出柱子;分配系數大的組分滯留在固定相中的時間長,在柱內移動的速度慢,后流出柱子;分離后的各組分經檢測器轉換成電信號而記錄下來,得到一條信號隨時間變化的曲線,稱為色譜流出曲線或色譜峰,理想的色譜流出曲線應該是正態分布曲線:

典型色譜流出曲線

. 術語

1. 基線操作條件穩定后,沒有試樣通過時檢測器所反映的信號-時間曲線稱為基線(O - O’

(它反映檢測系統噪聲隨時間變化的情況,穩定的基線應是一條水平直線)

2. 死時間 t0dead time):

    指不被固定相吸附或溶解的組分(如空氣、甲烷等)從進樣開始到色譜峰頂所對應的時間,如圖t0所示。

3. 死體積 V0dead volume ):

     由進樣器至檢測器的流路中,未被固定相占有的空隙   體積稱為死體積

(導管空間、色譜柱中固定相間隙、檢測器內腔空間總和)

   當色譜柱載氣流速為F0(mlmin)時,它與死時間的關系為:

                            V0  = t0·F0                             (1)

   4. 保留值:定性參數,是在色譜分離過程中,試樣中各組分在色譜柱內滯留行為的一個指標。

 1保留時間 tR retention time):

    從進樣到柱后出現待測組分濃度最大值時(色譜峰頂點)所需要的時間,稱為該組分的保留時間。如圖中tR(1)、 tR(2) 所示,是待測組分流經色譜柱時,在兩相中滯留的時間和)

    保留時間與固定相和流動相的性質、固定相的量、柱溫、流速和柱體積有關,可用時間單位(min)表示。

2調整保留時間 tRadjusted retention time):

    扣除死時間后的組分保留時間,如圖中的tR(1) tR(2)所示。tR表示某組分因溶解或吸附于固定相后,比非滯留組分在柱中多停留的時間:

                           tR’= tRt0                                      (2)

3保留體積 VR retention volume):

     從進樣到柱后出現待測組分濃度最大值時所通過的載氣體積。

     當色譜柱載氣流速為F0(ml/min)時,它與保留時間的關系為:

VR = tR F0                                      (3)

4)調整保留體積 VRadjusted retention volume):是指扣除死體積后的保留體積,即:                VR’=  VRV0tR’·F0                     (4)

 在一定的實驗條件下VR、VR與載氣流速無關(tR·F0 tR’·F0為一常數)

5相對保留值 r21relative retention value):指組分 2 和組分 1 的調整保留值之比。

                    (5)

    相對保留值的特點是只與溫度和固定相的性質有關,與色譜柱及其它色譜操作條件無關。反映了色譜柱對待測兩組分1 2 的選擇性,是氣相色譜法中最常使用的定性參數。

3.峰高(h):色譜峰頂與基線之間的垂直距離

4. 色譜的區域寬度(peak width)通常用三種方法來表示:

1)標準偏差s standar deviation):

     為正態分布曲線上拐點間距離之半。對于正常峰,s0.607倍峰高處色譜峰寬度的一半。

s 的大小表示組分被帶出色譜柱的分散程度,s 越大,組分流出越分散;反之亦反。s 的大小與柱效有關,s 小,柱效高)

2)半()峰寬 Wh/2peak width at half-height):

     峰高一半處的色譜峰寬度。半峰寬與標準偏差的關系為:

                 (6)

3)峰寬或稱Wb:通過色譜峰兩側的拐點作切線,切線與基線交點間的距離為峰寬,即圖中GH。

     峰寬與標準偏差的關系為:  Wb = 4s = 1.699 Wh/2

 
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