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液相色譜-串聯質譜法檢測獸藥殘留實驗問題討論

放大字體  縮小字體 發布日期:2019-10-22  來源:煙臺市食品藥品檢驗檢測中心  作者:初坤
核心提示:在畜禽的養殖過程中,遺留在動物體內的獸藥殘留隨著食品在市場中的流通進入人體,威脅著食用動物性食品消費者的身體健康。液相色譜

在畜禽的養殖過程中,遺留在動物體內的獸藥殘留隨著食品在市場中的流通進入人體,威脅著食用動物性食品消費者的身體健康。液相色譜-串聯質譜檢測獸藥殘留技術具有適應性強、靈敏度高等特點,在我國禽畜農產品獸藥檢測領域中得到廣泛應用。

 

 

在日常使用液相色譜-串聯質譜法檢測獸藥殘留時,遇到的實驗問題的討論。

 

實驗樣品污染的來源分析

1. 檢測像磺胺和沙星類等可以作為人用藥品的獸藥殘留檢驗項目時,要注意防止實驗人員對樣品的污染。

尤其是氯霉素這種常作為人用滴眼液和外用藥膏的藥物,極易通過直接接觸污染實驗室環境。

所以在樣品制備和實驗過程中,實驗人員需佩戴實驗手套并經常更換。同時做過加標實驗的實驗器皿盡量不要重復使用,使用過的實驗設備要清洗干凈。

2. 在粉碎制備樣品時,使用的器具需要清洗干凈并晾干后,再繼續使用。

3. 樣品提取液需要氮吹時,為防止交叉污染:注意提前清洗氮吹針外壁;使用完氮吹儀后,要對氮吹針再次進行清洗。

4. 進行孔雀石綠類項目的檢測時,注意記號筆的污染。

5. 實驗所選用的0.22μm液相濾膜,應采用與樣品最終定容液溶劑相同的標準溶液檢驗。確認濾膜無吸附和溶解現象后,方可使用。

6. 實驗試劑優先選擇色譜純級別的試劑,防止實驗試劑的污染。

 

實驗數據不穩定的原因

 

1.有些藥物在樣品組織作用位置不同,所以在樣品中分布并不均勻。所以在樣品制備時的采樣量必須足夠大,并且試樣需要混合均勻。

2.連續使用同一樣品進樣瓶多次進樣,檢查液相色譜-串聯質譜儀的系統穩定性。

3.使用同位素內標定量的實驗:

稱取試樣加入同位素內標后,需要充分振蕩混合樣品,并靜置30分鐘以上。使同位素內標充分吸附于樣品。否則內標并未吸附于樣品組織,直接被提取液提取,造成實驗結果偏低。

需注意同位素內標的添加濃度與樣品組分檢出的濃度不可相差太大,否則同位素內標的回收率不易具有代表性,影響定量的準確性。

4.隱色孔雀石綠和隱色結晶紫等不穩定項目,進樣液不要過夜。

5.使用固相萃取柱時,注意控制樣品流速:

流速過快,固相萃取柱的吸附易不完全,容易造成實驗回收率不穩定;流速過慢,固相萃取柱可能會吸附過多雜質,容易影響實驗結果。

6.固相萃取柱和QuEChERS試劑盒開封后要保存在陰涼干燥處,防止吸水失效。

7.注意液相濾膜和液相進樣小瓶等可能對四環素類藥物有吸附現象。

 

 

提高實驗數據準確性的方法

1.需注意樣品基質對離子對響應值的影響。可通過增大稀釋倍數減小來基質干擾,或者使用空白樣品基質溶液配制標準曲線。

2.注意樣品最終定容液對響應值的影響。盡量使用與標準品或者流動性組成比例一致的定容液。

3.可采取加標實驗和制作基質加標曲線等方法,驗證檢驗結果。

4.配置標準曲線時,曲線范圍盡量使檢出的樣品濃度居于標準曲線濃度的中間,同時標準曲線的線性范圍不可太寬。

5.注意液相色譜-串聯質譜儀的儀器穩定性,標準曲線和樣品的進樣時間不可間隔過長。

編輯:songjiajie2010

 
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