厭氧菌在有氧的情況下不能生長.要培養厭氧菌,必須創造一個無氧的環境.通常用培養基中加入還原劑,或用物理、化學方法去除環境中的游離氧,以降低氧化還原電勢.如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基,牛心腦浸液培養基等.常用的厭氧培養方法有許多,可根據實際情況選用.
厭氧缸法
接種好標本的平板或液體培養基試管,可放入厭氧缸內培養,厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而將厭氧菌培養出來.
厭氧袋法(bio-bag)
即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌.塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑.放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內空氣,然后密封袋口.先折斷氣體發生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時內造成無氣環境.如不突變表示袋內已達厭氧狀態,可以孵育.
厭氧手套箱法(anaerobie glove box)
一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內進行操作,故名.箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著.欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(h2,co2,n2)達到厭氧狀態,然后手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門.箱內保持厭氧狀態,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理.該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗.金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節.