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植物制片的一般原理與方法

放大字體  縮小字體 發布日期:2013-07-24  來源:實驗室資訊網
核心提示: 第一章 植物制片的方法及準備植物制片技術是植物顯微技術課的一個重要組成部分,在有關植物形態建成、植物雜交育種、作物病蟲害
  第一章 植物制片的方法及準備 
植物制片技術是植物顯微技術課的一個重要組成部分,在有關植物形態建成、植物雜交育種、作物病蟲害防治、藥用植物的培育和鑒別以及林木材性鑒定等多方面的研究和教學工作中,都需要應用顯微制片技術,由于各種作物器官的性質差異以及研究目的的不同,就需要不同的制片方法,但因限于學時及篇幅,本書僅根據常用的基本原理及教學中行之有效的方法加以介紹。

第一節植物制片的基本要求與主要制片方法 
植物內部結構不能用大而厚的組織塊置于顯微鏡下觀察,必須進行制作切片,才能供顯微鏡下觀察應用。
石蠟(或徒手)切片,是將植物切成薄的材料,按下列主要步驟與要求制成永存切片。
1.采樣:材料的選擇與分割
2.殺生、固定與器皿清洗
3.沖洗(有的不經此步)
4.脫水(各級酒精)
5.透明
6.滲透(例如浸蠟)
7.包埋(石蠟包埋)
8.切片(切片機或徒手切片)
9.粘片
10.烘片
11.脫包埋劑(石蠟)
12.經各級酒精(脫水)
13.染色
14.分色
15.脫水
16.透明
17.封藏成永存片
從上述主要環節來看,首先將材料加以處理(1、2、3項),第二步進行制片基礎的處理工作(4、5、6、7項),在保證質量完成這兩類工作基礎上,方可順利完成切片工作(包括8、9、10項),也就是說切出符合規格的薄片來,然后再對組織進行染色、脫水、透明等一系列工作,才可制成透明清晰、染色鮮艷、適合顯微鏡觀察攝影,并作教學、科研長期保存的永存片。其詳細制片過程與方法,在以后章節內加以介紹。
通常制片分兩大類型。

第二節 溶液的配制 
(一)各級酒精濃度的配制 在植物制片中常用各級酒精,一般以95%酒精來配制,為節約起見,避免用無水酒精來配制各級酒精(表1一2)。
在實驗中使用酒精量較大,每次以量筒量液花費時間多,可在500ml細口瓶有玻璃塞的瓶上貼一條寬1cm與瓶等長的白色紙條,僅在第一次用量筒量酒精與蒸館水的用量處劃上刻度,以后每當瓶內溶液用完,即以紙條上刻度分別倒入酒精和蒸館水的各用量即可。
(二)低濃度溶液配制 制片中染色液絕大多數為此類溶液。如1%番紅水溶液,即為番紅1g溶于l00mL的蒸餾水中;又如0.5%曙紅(伊紅)酒精溶液為0.5g曙紅溶于l00mL的95%酒精中。
其他如重量百分比濃度、摩爾濃度、克當量濃度等溶液的配制,在附錄5中介紹。

第二章 石蠟法制片原理與方法 

第一節 材料的選擇與分割 
材料的選擇和切割是根據研究目的而決定的,應注意以下諸條件。
1.應選取新鮮、無病蟲害并具代表性的材料。
2.先作徒手切片或剝離檢查,決定適宜的材料立即固定處理。
3.注意按季節及植物生長發育的不同階段而選取材料。
4.材料大小要適當,如根的直徑在5mm以內的,可切取5-10mm長的小段,直徑在5mm以上者可縱分割成1/2或1/4,橫切厚度約3-5mm;若以滑走切片機切片,長度約在2-3.5cm。
葉的切取切成2-5mm,若葉較寬可切10mm的長條,葉面切取的部位,以研究者的目的靈活選取。切取材料必須使用新刀片,刀口和葉面垂直迅速切割下來。
花、果的切割:花藥和雄蕊切割,花芽和幼穗的切割,須剝去外部鱗片及葉鞘和其他部分,切去多余部分再入固定液,有的花序則需去掉外方苞片,一般小的花不經切割可投入固定液,大花果才進行分割處理。
編輯:songjiajie2010

 
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關鍵詞: 植物制片
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