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植物制片的一般原理與方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-07-24  來源:實(shí)驗(yàn)室資訊網(wǎng)
核心提示: 第一章 植物制片的方法及準(zhǔn)備植物制片技術(shù)是植物顯微技術(shù)課的一個(gè)重要組成部分,在有關(guān)植物形態(tài)建成、植物雜交育種、作物病蟲害
  第一章 植物制片的方法及準(zhǔn)備 
植物制片技術(shù)是植物顯微技術(shù)課的一個(gè)重要組成部分,在有關(guān)植物形態(tài)建成、植物雜交育種、作物病蟲害防治、藥用植物的培育和鑒別以及林木材性鑒定等多方面的研究和教學(xué)工作中,都需要應(yīng)用顯微制片技術(shù),由于各種作物器官的性質(zhì)差異以及研究目的的不同,就需要不同的制片方法,但因限于學(xué)時(shí)及篇幅,本書僅根據(jù)常用的基本原理及教學(xué)中行之有效的方法加以介紹。

第一節(jié)植物制片的基本要求與主要制片方法 
植物內(nèi)部結(jié)構(gòu)不能用大而厚的組織塊置于顯微鏡下觀察,必須進(jìn)行制作切片,才能供顯微鏡下觀察應(yīng)用。
石蠟(或徒手)切片,是將植物切成薄的材料,按下列主要步驟與要求制成永存切片。
1.采樣:材料的選擇與分割
2.殺生、固定與器皿清洗
3.沖洗(有的不經(jīng)此步)
4.脫水(各級(jí)酒精)
5.透明
6.滲透(例如浸蠟)
7.包埋(石蠟包埋)
8.切片(切片機(jī)或徒手切片)
9.粘片
10.烘片
11.脫包埋劑(石蠟)
12.經(jīng)各級(jí)酒精(脫水)
13.染色
14.分色
15.脫水
16.透明
17.封藏成永存片
從上述主要環(huán)節(jié)來看,首先將材料加以處理(1、2、3項(xiàng)),第二步進(jìn)行制片基礎(chǔ)的處理工作(4、5、6、7項(xiàng)),在保證質(zhì)量完成這兩類工作基礎(chǔ)上,方可順利完成切片工作(包括8、9、10項(xiàng)),也就是說切出符合規(guī)格的薄片來,然后再對(duì)組織進(jìn)行染色、脫水、透明等一系列工作,才可制成透明清晰、染色鮮艷、適合顯微鏡觀察攝影,并作教學(xué)、科研長期保存的永存片。其詳細(xì)制片過程與方法,在以后章節(jié)內(nèi)加以介紹。
通常制片分兩大類型。

第二節(jié) 溶液的配制 
(一)各級(jí)酒精濃度的配制 在植物制片中常用各級(jí)酒精,一般以95%酒精來配制,為節(jié)約起見,避免用無水酒精來配制各級(jí)酒精(表1一2)。
在實(shí)驗(yàn)中使用酒精量較大,每次以量筒量液花費(fèi)時(shí)間多,可在500ml細(xì)口瓶有玻璃塞的瓶上貼一條寬1cm與瓶等長的白色紙條,僅在第一次用量筒量酒精與蒸館水的用量處劃上刻度,以后每當(dāng)瓶?jī)?nèi)溶液用完,即以紙條上刻度分別倒入酒精和蒸館水的各用量即可。
(二)低濃度溶液配制 制片中染色液絕大多數(shù)為此類溶液。如1%番紅水溶液,即為番紅1g溶于l00mL的蒸餾水中;又如0.5%曙紅(伊紅)酒精溶液為0.5g曙紅溶于l00mL的95%酒精中。
其他如重量百分比濃度、摩爾濃度、克當(dāng)量濃度等溶液的配制,在附錄5中介紹。

第二章 石蠟法制片原理與方法 

第一節(jié) 材料的選擇與分割 
材料的選擇和切割是根據(jù)研究目的而決定的,應(yīng)注意以下諸條件。
1.應(yīng)選取新鮮、無病蟲害并具代表性的材料。
2.先作徒手切片或剝離檢查,決定適宜的材料立即固定處理。
3.注意按季節(jié)及植物生長發(fā)育的不同階段而選取材料。
4.材料大小要適當(dāng),如根的直徑在5mm以內(nèi)的,可切取5-10mm長的小段,直徑在5mm以上者可縱分割成1/2或1/4,橫切厚度約3-5mm;若以滑走切片機(jī)切片,長度約在2-3.5cm。
葉的切取切成2-5mm,若葉較寬可切10mm的長條,葉面切取的部位,以研究者的目的靈活選取。切取材料必須使用新刀片,刀口和葉面垂直迅速切割下來。
花、果的切割:花藥和雄蕊切割,花芽和幼穗的切割,須剝?nèi)ネ獠亏[片及葉鞘和其他部分,切去多余部分再入固定液,有的花序則需去掉外方苞片,一般小的花不經(jīng)切割可投入固定液,大花果才進(jìn)行分割處理。
編輯:songjiajie2010

 
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