1.學會植物細胞、組織的固定、離析和壓片方法,了解并初步掌握制作臨時玻片和永久玻片的方法。
2.觀察有絲分裂過程中染色體的形態特征和動態變化過程,著重了解分裂期內中、后期染色體變化的特征。
二、實驗原理
植物根尖分生組織的細胞,依一定的程序有規律地進行著有絲分裂過程,植物種類不同,細胞周期所需時間不同。
每天都有分裂高峰時間,此時把根尖固定,經過染色和壓片,再放置在顯微鏡下進行觀察,可以看到大量處于有絲分裂各時期的細胞和染色體。
一些植物根尖細胞的分裂周期(小時)
根尖與莖尖是有絲分裂的高發部位,根尖由于取材方便,是觀察植物染色體最常用的材料,根尖染色體壓片法,是觀察植物染色體最常用的方法,也是研究染色體組型、染色體分帶、染色體畸變和姊妹染色單體交換的基礎。
如果植物種子難以發芽,或僅有植株而無種子,也可以用莖尖作為材料。實驗結果顯示:植物細胞分裂周期的長短不盡相同,通常在十到幾十小時之間,溫度明顯地影響細胞分裂周期,同時不同植物有絲分裂高峰時間不盡相同,洋蔥根尖細胞以6點到9點分裂相較多。適于取材。
三、實驗材料
大蒜、洋蔥的鱗莖或蠶豆的種子
四、實驗器具和藥品
1.用具:載玻片,蓋玻片,指管,試劑 瓶,滴瓶,鑷子,解剖針,吸水紙。
2.藥品:無水酒精,冰醋酸,醋酸鈉,改良苯酚品紅。
五、實驗過程
1.材料培養
先剪去洋蔥的老根,然后置于盛有水的燒杯上,等不定根長出2cm時,進行預處理;或將蠶豆等種子經過吸脹處理24小時后,平展于鋪有吸水紙的白磁盤中,加入適當量的水,于25℃培養,待側根長到2cm進行預處理。
2. 預處理
預處理可以降低細胞質的粘度,使染色體縮短分散,防止紡錘體形成,使更多的細胞處于分裂中期,一般在分裂高峰前把根尖放到藥劑中處理3—4小時。可利用進行處理的藥劑很多,如秋水仙素、對二氯苯、8—羥基喹啉等,也可以經過低溫處理以達到同樣的效果,較成功的例子主要是一些禾本科的農作物,例如:小麥、黑麥、大麥用1~4℃,水稻和玉米用6~8℃,均獲得較好的效果。處理方法是將活體或切取根尖侵入自來水或蒸餾水中,放置在冰箱中合適的溫度層處理20—40小時。在野外或無冰箱條件下,可在保溫瓶中裝一些冰塊做低溫處理。
處理時機:當根尖長到1.5cm~2cm左右時進行處理,此時分裂相較多,制片效果好。