為了對水體汞(甲基汞)污染所引起的健康危害進行科學評價,統一診斷標準,以推動防治和污染治理工作,特制定本標準。
1 診斷原則
根據水體汞污染水平、食用被汞污染的魚貝類食物的歷史、體內汞蓄積狀況、以及臨床表現和化驗資料,進行綜合分析,排除其他疾病,方可診斷。
2 診斷及分級
2.1甲基汞吸收
頭發中總汞值超過10μg/g,其中甲基汞值超過5μg/g者。
2.2觀察對象
在汞吸收的基礎上,出現下列三項體征當中的1~2項陽性體征者。
a.四肢周圍型(手套、襪套型)感覺減退。
b.向心性視野縮小15~30度。
c.高頻部感音神經性聽力減退11~30dB。
2.3慢性甲基汞中毒
在汞吸收的基礎上,具有下列a、b、c三項體征者,可診斷為慢性甲基汞中毒。
a.四肢周圍型(手套、襪套型)感覺減退。
b.向心性視野縮小15~30度,或有顳側月芽狀缺損到30度者。
c.高頻部感音神經性聽力減退l1~30dB。
d.具有上述三項體征,但發汞低于10μg/g以下時,可做驅汞試驗,驅汞后尿中總汞值超過20μg/L,其中甲基汞超過10μg/L者,方可診斷。
3 處理原則
禁止食用被甲基汞污染水體的魚貝類食物。
3.1 甲基汞吸收
定期檢查發汞。
3.2 觀察對象
定期復查。
3.3 慢性甲基汞中毒
適當休息、驅汞治療、定期復查。
A.1詢問:四肢遠端麻木感、頭痛、頭暈、無力、健忘、睡眠障礙、流涎、多浮等,以及有無其他中毒史和其他神經病史。
A.2痛覺:按目前普遍應用的針刺法,在兩側肢體相應部位上對比檢查,由遠端向近端檢查,讓受檢者回答有無痛覺減退。
A.3溫度覺:用金屬管分別盛10~15℃水測冷覺;用金屬管盛50~55℃水測熱覺。進行兩側肢體遠端、近端對比檢查,讓受檢者區別涼熱程度。
A.4觸覺:用棉絮進行兩側肢體遠端、近端對比檢查,讓受檢者回答有無觸覺減退。
A.5振動覺:以C 128振的音叉進行雙側遠端、近端對比檢查,讓受檢者回答振動感的程度。
A.6小腦功能檢查:檢查構音、眼球震顫、走直線、昂白(Romberg′s)氏征、指鼻、輪替及跟膝脛試驗等。
A.7 有條件可檢查肌電、神經傳導速度等。
附錄B視野檢查法(補充件)
B.1儀器
用光點投射視野計或330mm半徑的弓形視野計。視標3~5mm白色視標。
B.2 方法步驟
a.用光點投射視野計檢查,在暗室進行,用弓形視野計時,爭取在固定人工照明下進行。受檢者將下頜置于視野計頦架上遮蓋一眼,分別檢查。
b.用3~5mm白視標分別檢查8~12個方位。
c.記錄于視野紙上,以備判斷。
B.3 注意事項
a.視野檢查背景光應為“明適應”狀態,選用30lx左右,視標光斑亮度約為背景光的一倍。
b.視野首選3mm直徑。如果視野已表現為較重的向心性縮小,可收用5或10mm的視標重查。此時可能只呈現顳側月芽狀缺損(表明矩狀裂前端病變較重),有助于對本病的診斷。
c.檢查視野的各項條件,在各次檢查中統一標準。
d.檢查時視標由里向外或由外向里移動,其結果相差在10度以內者,則取用多次所在點位,如果相差在10度以上者,應考慮為視標移動太快或病人反應遲鈍,有待追隨復查。
e.有瞼下垂或上瞼皮膚松弛影響檢查結果時,應協助處理后再行檢查。
B.4 其他
a.在有條件情況下,對視野明顯缺損者,建議做ERG,暗適應等。
b.為了解視皮質功能狀態,建議用VEP。
C.1測聽儀器
純音聽力計。
C.2方法
a.檢查外耳及中耳情況,以排除傳音性聾。詳細詢問病史,排除其他原因所致的感音神經性聾。
b.在隔音條件下分別檢測兩耳聽閾,先測氣導,后測骨導,檢測時,以5dB為一檔,檢測骨時必須加適量噪聲遮蓋。
c.有條件可查語言測聽的最大清晰度(PBmax),Bekesy測聽、聲阻抗測聽和耳蝸電圖及腦干電測聽。
C.3記錄方法
檢查結果按全國通用符號標記。右耳氣導符號為“O”左耳為“x”。右耳骨導符號為“[”, 左耳為“]”。氣導以實線相聯,骨導以虛線相聯,制成聽力曲線。
C.4 檢查標準
慢性甲基汞中毒引起的聽力損失在高頻部(2、4、6、8 kHz),高頻部平均損失11~30dB為輕度;31~60dB為中度;61~90dB為重度; 91dB以上為全聾。
D.1原理
汞蒸氣對波長253.7nm的紫外光具有強烈的吸收作用,試樣經適當處理后,將各種形態的汞轉變成汞離子,用氯化亞錫將汞離子還原成元素汞,再用測汞儀進行測定,汞濃度與吸收值成正比。
D.2方法一
加氧燃燒-冷原子吸收法。
D.2.1儀器
a.測汞儀(F732型系列)。
b.管式電爐。
D.2.2試劑
D.2.2.1 30%氯化亞錫:取30g氯化亞錫(SnCl2·2H2O)溶于100ml 1N硫酸溶液中,或加10ml濃鹽酸,溶解后用去離子水稀釋至100ml(發黃的氯化亞錫不能用)。
D.2.2.2吸收液:2%高錳酸鉀溶液和10%硫酸溶液,臨用時等體積混合。
D.2.2.3汞標準液:
a.汞標準貯備液:稱取二氯化汞(分析純)0.1354g,用1N硫酸溶解并稀釋至100ml。此溶液1.00ml等于1.00mg汞。
b.汞標準使用液:用1N硫酸把貯備液稀釋成1.00ml含有0.10μg汞。此溶液使用前配制。
D.2.3分析步驟
D.2.3.1樣品處理:準確稱取處理好的發樣0.1~0.2g置于石英舟中(上蓋一小塊濾紙),將石英舟放入管式電爐的石英管里,石英管的一端與氧氣瓶連接,另一端與盛有20ml吸收液的吸收管連接。如下:
將爐溫控制在750±50℃通氧氣(流速2L/min),分段燃燒3min,樣品中的汞富集于吸收液中,備作測定。 D.2.3.2測定:準確吸取一定體積吸收液(燃燒后的)于汞反應瓶中,加入2m1 30%氯化亞錫溶液后立即塞緊瓶塞,開動循環泵,讀取最大吸收值,根據標準曲線求出汞含量。 D.2.4標準曲線的繪制:分別吸取0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00ml汞標準使用液于汞反應瓶中,配成的標準系列為0.00,0.05,0.10,0.20,0.30,0.40,0.50μg汞,以1N硫酸溶液稀釋到一定體積,加入2ml 30%氯化亞錫溶液,立即塞緊瓶塞,開動循環泵,讀取最大吸收值。以吸收值為縱坐標,汞量(μg)為橫坐標,繪制標準曲線,繪制時應減去空白值。
D.2.5計算
汞(Hg,μg/L)=讀取汞量(μg)×吸收液總體積(ml)/[發樣重量(g)×測定取試樣溶液體積(ml)……………………(1)
D.2.6注意事項
a.石英器皿在使用前或測定后必須清洗。
b.測定時石英管出口及連接部位塞緊,避免漏氣。
D.3 方法二
三酸混合消解法。
D.3.1儀器
a.測汞儀(F-732型)。
b.50ml汞發生管。
c.100ml三角瓶。
d.漏斗。
e.可調電爐。
D.3.2試劑
a.硝酸,優級純。
b.硫酸,優級純。
c.高氯酸,優級純。
d.5%高錳酸鉀溶液:稱取5g優級純高錳酸鉀溶于100ml去離子水中。
e.10%鹽酸羥胺溶液:稱取分析純鹽酸羥胺10g溶于去離子水中,并稀釋至100ml。
f.30%氯化亞錫溶液:同D.2.2.1。
g.汞標準溶液:同方法一。
D.3.3分析步驟
D.3.3.1樣品消化:稱取清洗過的發樣50mg,放入100ml三角瓶中,同時做空白試驗,加入硝酸5ml。放入一些小玻璃球,三角瓶放在電熱板上加熱5min,加硫酸5ml繼續加熱10min,再加高氯酸1ml加熱5min取下,冷卻后加入少量去離子水,滴加5%高錳酸鉀呈紫紅色,將此溶液洗入50ml汞發生管備用。
D.3.3.2樣品測定:往消化液中加入10%鹽酸羥胺0.25ml,使高錳酸鉀的紫色消失,加入20%氯化亞錫5ml,立刻測定,讀取測得值,從標準曲線上查出汞含量。
D.3.4標準曲線制作
取0.10μg/ml汞標準使用液0,0.1,0.3,1.0,1.2,1.5,2.0ml。分別置于50ml汞發生管中,加入少量去離子水,然后加入5ml硫酸,1滴高錳酸鉀,用去離子水稀釋到50ml,加入10%鹽酸羥胺0.25ml,使高錳酸鉀的紫色消失,加入5ml 20%氯化亞錫,進行測定。以測得值為縱坐標,汞含量為橫坐標,制備標準曲線。
D.3.5 計算
總汞(μg/g)=查出的汞含量(μg)/樣品重量(g)…………………………………(2)
D.3.6 注意事項
D.3.6.1 硝酸加入樣品后,加熱溫度控制在130℃以下,使反應緩慢進行,加入硫酸、高氯酸后,消化溫度控制在250℃左右,以二氧化硫白煙產生為消化終點,立刻取下,否則會造成汞損失。
D.3.6.2 注意玻璃容器對汞的吸收。所有的玻璃容器,特別是新用的玻璃容器,使用前用熱高錳酸鉀-硫酸溶液洗二次,再用去離子水沖洗干凈。
附錄E頭發及尿中甲基汞含量的測定方法(補充件)
E.1 原理
用鹽酸浸提出樣品中的甲基汞,在pH=3條件下,經疏基棉富集,用2N鹽酸解析,以苯萃取。采用氣相色譜儀測定苯萃取液中的甲基汞。 E.2 儀器和試劑
E.2.1 儀器
a.氣相色譜儀:具電子捕獲檢測器。
b.疏基棉管:自制,內徑8~10mm玻璃管,長10~15cm,一端拉細,一端平口。
E.2.2 試劑
a.苯:優級純,色譜圖上無干擾氯化甲基汞的雜峰。
b.鹽酸;優級純。
c .氯化甲基汞標準溶液。
d.巰基棉:取50ml硫代乙醇酸(HS-CH2COOH),加入35ml乙酸酐,16ml 36%乙酸,0.15ml濃硫酸,5ml去離子水于具塞三角燒瓶中混勻。加入15g脫脂棉浸透,加塞放在37~39℃的烘箱中烘四天,取出用蒸餾水洗至中性,擠掉水分后攤在瓷盤上,置于39℃烘箱中烘干(注意避免污染),成品保存于棕色廣口瓶中備用。新制備的疏基棉需用甲基汞標樣進行回收率實驗,回收率在95%以上者方可應用。
e.硫酸銅溶液:溶解50g CuSO4·5H20于200ml去離子水中。
E.3:操作步驟
E.3.1樣品提取
E.3.1.1頭發:準確稱取經過清洗的發樣0.1~0.5g,放人20ml離心管中,加入5m1 2N鹽酸,浸泡過夜,用去離子水稀釋至20ml左右,投入1~2g氯化鈉,將清液傾人分液漏斗中,調節pH=3。以下按濃縮步驟進行。
E.3.1.2人尿:取尿樣50~100ml于分液漏斗中,用濃鹽酸酸化至1N,加入幾滴硫酸銅溶液,10min后用氫氧化鈉溶液和稀鹽酸調節pH=3,以下操作按濃縮步驟進行。
E.3.2濃縮
在分液漏斗下端接上巰基棉管,令提取液通過巰基棉并以每分鐘40滴的速度流出。流完后用蒸餾水沖洗分液漏斗管壁。最后用二聯球加壓吹出最后一滴。
取下巰基棉管。將其放在具塞比色管上,加入2ml 2N鹽酸,令其自然流下,用玻璃棒擠凈殘存酸液。
準確取1ml純苯,加入上述比色管中,振搖3min,以萃取鹽酸中的甲基汞,待分層后即可取上層苯液進行色譜測定。
E.4 色譜條件
a.固定液:國產7%丁二酸乙二醇聚酯或7%PEG-20M。
b.擔體:上試201酸洗紅色擔體(預涂5%NaCl)或Chromosorb W 60~80目。
c.色譜柱:1m×4mm不銹鋼柱或玻璃柱。
d.柱溫:165~170℃。
e.檢測器溫度:175~180℃。
f.氣化室溫度:210℃。
g.出口溫度:150℃。
h.載氣:高純氮,流速70mL/min。
E.5 結果計算
甲基汞(μg/g或μg/L)=標準甲基汞量(μg)×樣品峰高(mm)×萃取液總體積(mL)/[標準峰高(mm)×進樣體積(ml)×發樣重量(g)或尿樣體積(L)]
附錄F尿中總汞含量的測定方法(補充件)
F.1 原理
在堿性溶液中鎘離子催化下,尿中各種形態的汞能迅速地被氯化亞錫還原為元素汞,用測汞儀測定其總汞含量。
E.2 儀器 測汞儀: F732型,附帶10~15ml翻泡瓶。
F.3 試劑
a. 30%氫氧化鈉溶液(優級純)。
b. 氯化亞錫。硫酸鋼鎘度劑:取氯化亞錫(分析純)10g,加鹽酸(優級純)5m1,溶解后加去離子水至20ml,加入硫酸鎘(分析純)1.6g。臨用前配制。
c. 抗泡劑:磷酸三丁酯或滅泡劑(天津助劑廠)。
d. 2%L-半胱胺酸溶液。
e. 汞標準液:1m1含0.1g汞(Hg2+)。
F.4測定
吸取尿樣5-10ml于翻泡瓶中,加30%氫氧化鈉2ml,2%L-半胱胺酸0.25m1,抗泡劑1~2滴,氯化亞錫-硫酸銅試劑1m1,立即塞緊瓶塞,開動循環泵,讀取最大吸收值。
F.5標準曲線制作
取汞標準液(0~0.15μgHg2+),按上述測定方法,測定其吸收值,以汞標準液濃度為橫坐標,吸收值為縱坐標,繪出標準曲線。
F.6 結果計算
尿汞含量(μg/L)=相當于標準液汞的微克數/尿樣量(L)
G.1本標準的使用范圍
凡長期大量食用被汞污染水體的魚貝類食物者,可按本標準診斷及處理。
G.2幾點說明
G.2.1慢性甲基汞中毒診斷,應由省級以上的專門診斷組織進行。
G.2.2長期大量食用汞污染魚
長期是指經常食用汞污染魚達半年以上。大量是指平均每天食用汞污染魚500g以上。汞污染魚是指在汞污染水體中的魚貝類汞含量超過我國食品衛生標準規定0.3μg/g。
G.2.3驅汞試驗
用5%二巰基內磺酸鈉5ml一次肌肉注射后,收集24h尿量,測尿中總汞及甲基汞含量。
G.2.4采發樣部位及清洗方法
采取后發際貼頭皮的頭發。
發樣清洗:將發樣置于10%中性洗滌劑中浸泡10min,振搖洗滌后,再依次用自來水、去離子水漂洗,干燥后剪成1~3mm長備用。如果發樣油脂較多,可將按上述方法清洗后的發樣,浸泡于乙醚(或丙酮)中,攪拌10min后取出晾干備用。
附加說明:
本標準由中華人民共和國衛生部提出。
本標準由白求恩醫科大學、哈爾濱醫科大學負責起草。
本標準由衛生部委托白求恩醫科大學、哈爾濱醫科大學負責解釋。