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平板菌落計數(shù)法具體標(biāo)準(zhǔn)步驟(一)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-07-08  來源:網(wǎng)絡(luò)
核心提示:操作方法一:1.以無菌操作取檢樣25g(或25ml),放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或

操作方法一:

1.以無菌操作取檢樣25g(或25ml),放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振搖或研磨制成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后,最好置滅菌均質(zhì)器中以8000~10000r/min的速度處理1min,制成1:10的均勻稀釋液。用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi),振搖試管混合均勻,制成1:100的稀釋液。另取1ml滅菌吸管,按上項操作順序,制10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管。

2.無菌操作:操作中必須有“無菌操作”的概念,所用玻璃器皿必須是完全滅菌的,不得殘留有細(xì)菌或抑菌物質(zhì)。所用剪刀、鑷子等器具也必須進行消毒處理。樣品如果有包裝,應(yīng)用75%乙醇在包裝開口處擦拭后取樣。操作應(yīng)當(dāng)在超凈工作臺或經(jīng)過消毒處理的無菌室進行。瓊脂平板在工作臺暴露15分鐘,每個平板不得超過15個菌落。

3.采樣的代表性:如系固體樣品,取樣時不應(yīng)集中一點,宜多采幾個部位。固體樣品必須經(jīng)過均質(zhì)或研磨,液體樣品須經(jīng)過振搖,以獲得均勻稀釋液。

4.樣品稀釋誤差:為減少樣品稀釋誤差,在連續(xù)遞次稀釋時,每一稀釋液應(yīng)充分振搖,使其均勻,同時每一稀釋度應(yīng)更換一支吸管。在進行連續(xù)稀釋時,應(yīng)將吸管內(nèi)液體沿管壁流入,勿使吸管尖端伸入稀釋液內(nèi),以免吸管外部粘附的檢液溶于其內(nèi)。為減少稀釋誤差,SN標(biāo)準(zhǔn)采用取10mL稀釋液,注入90mL緩沖液中。

5.稀釋液:樣品稀釋液主要是滅菌生理鹽水,有的采用磷酸鹽緩沖液(或0.1%蛋白胨水),后者對食品中已受損傷的細(xì)菌細(xì)胞有一定的保護作用。如對含鹽量較高的食品(如醬油)進行稀釋,可以采用滅菌蒸餾水。 

圖片2 
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編輯:songjiajie2010

 
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