1.設備
蒸餾儀 Büchi K-360
滴定儀Metrohm 719
天平,精度萬分之一
消解儀 Büchi K424
2 藥品
HCl,0.1000mol/l 上海計量所
硼酸2%, 調整pH為4.65 國產分析純
NaOH 32%/ 33% (質量分數) 國產分析純
硫酸銨,99.99% Fluka
蒸餾水二次蒸餾水
PH=4/7緩沖液國產藥品配制
3 檢測過程
3.1 儀器檢測
檢測之前用標準物質硫酸銨進行回收率測試,保證我們儀器得出來的結果是真實可靠的。
蒸餾設置
已知硫酸銨的理論含氮量為21.21%,根據上面的表格中的空白值和樣品重量:(9.398-0.150)*0.1*14*0.001/0.0606=21.36%,回收率為21.36%/21.21%=100.7%。儀器的回收率范圍95%-105%,因此可以判斷,用來檢測的K360和滴定儀都是準確的,為下面的結果作出了保證。
3.2 樣品檢測
3.2.1樣品消解步驟
1 清洗樣品管,烘干。
2 稱取1克左右的樣品放入樣品管中。
3 每管加入4.5克硫酸鉀和0.5克硫酸銅。
4 每管加入98%硫酸20毫升,同時預熱K424。
5 消解90分鐘,冷卻樣品。
3.2.2樣品蒸餾
參數設置
蒸餾水:40毫升
氫氧化鈉:80毫升,直到樣品管變成黑色。
蒸餾4分鐘
蒸汽力度:100%
硼酸:40毫升
3.23 滴定
參數設置
滴定終點:4.65
滴定液HCl:0.1000mol/l
4 結果
該樣品的含氮量為1.23%,蛋白質含量為7.67%。從圖表可知,用buchi K360全自動蛋白質檢測系統可以得到重復性極好(RSD接近于0)的結果。