使用ACQUITY UPC2系統(tǒng)測定氨苯砜片(Dapsone)的色譜含量
一、目的

使用沃特世Waters®))ACQUITY  UPC2™系統(tǒng)將藥典中氨苯砜含量的正相HPLC測定方法轉(zhuǎn)換為超臨界流體色譜(SFC)方法。

二、背景

目前，美國藥典(USP)規(guī)定了含有氨苯砜(4,4’-二氨基二苯砜，CAS #80-08-0)藥物片劑的正相HPLC分析方法。使用4.0 x 300 mm，10µm的硅膠柱(L3)進(jìn)行等度分離，流動(dòng)相為正己烷、異丙醇、乙腈和乙酸乙酯(7:1:1:1)的混合溶液。該方法的運(yùn)行時(shí)間約為12.5min(最后一個(gè)主峰出峰時(shí)間的2倍，流速1.5mL/min)。如大多數(shù)藥典中的方法一樣，本方法經(jīng)過驗(yàn)證且可靠。但是，該方法使用了正己烷和乙酸乙酯溶劑。出于健康、安全和環(huán)保的原因，許多實(shí)驗(yàn)室都想減少這些溶劑的使用。超臨界液體色譜(SFC)是一種正相色譜分離技術(shù)，其使用CO2作為主流動(dòng)相，以極性溶劑(如甲醇)作為改性劑。由于SFC的原理與HPLC的原理相似，因此，目前的方法應(yīng)該能夠轉(zhuǎn)換成SFC方法，減少溶劑的消耗和處理，降低每次分析的成本，同時(shí)增強(qiáng)了健康、安全和環(huán)境方面的保護(hù)。轉(zhuǎn)換成SFC的色譜方法必須保持?jǐn)?shù)據(jù)質(zhì)量，而且必須得到與目前正相色譜方法一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

對尋求更高效、更低成本的氨苯砜片分析方法的實(shí)驗(yàn)室而言，ACQUITY UPC2系統(tǒng)不愧為理想之選，該方法同時(shí)加強(qiáng)了健康、安全和環(huán)境方面的保護(hù)。

三、解決方案

使用目前美國藥典(USP)方法，制備和分析氨苯砜標(biāo)準(zhǔn)品和片劑樣品，如圖1所示(該樣品也用于SFC分析)。使用目前USP方法的分析結(jié)果與使用ACQUITY UPC2方法得到的結(jié)果進(jìn)行對比，如圖2所示。


 

SFC方法的條件如下：

色譜柱： ACQUITY UPC2  BEH，3.0 x 50 mm，1.7µm

柱溫： 45 °C

流動(dòng)相： 85% CO2:15% MeOH

流速： 3.0 mL/min,

背壓： 130 bar/1885 psi

檢測器： UV /PDA，254 nm

藥典方法所列出的適應(yīng)性條件是最低要求(相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得大于2%)。標(biāo)準(zhǔn)品6次重復(fù)進(jìn)樣，目前正相HPLC方法得到的保留時(shí)間和峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)分別為<0.1%，<1.1%。超高效合相色譜方法UltraPerformance Convergence Chromatography™(UPC2)重復(fù)6次進(jìn)樣得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合USP藥典系統(tǒng)適應(yīng)性要求(保留時(shí)間RSD值0.8%，峰面積RSD值0.9%)，且運(yùn)行速度(1.75 min)大大加快。兩種方法測定片劑樣品的分析結(jié)果高度一致。本例中，每次正相HPLC分析使用正己烷13.1mL，異丙醇、乙腈和乙酸乙酯各1.9mL 。相比之下，UPC2方法僅消耗約0.50mL甲醇。這說明了通過將正相色譜方法轉(zhuǎn)換為UPC2方法可以大大地減少有機(jī)溶液的使用。根據(jù)目前的溶劑價(jià)格，每次正相色譜HPLC分析成本大約為1.08美元；相比之下，UPC2僅為0.01美元。

四、總結(jié)

使用ACQUITY UPC2，可以成功地將美國藥典的HPLC方法轉(zhuǎn)換為UPC2方法。這種新的UPC2方法得到的數(shù)據(jù)與目前的HPLC方法相當(dāng)，甚至更好；速度是目前的HPLC方法的7倍，并且消耗的溶劑更少。我們以更快的速度得到高品質(zhì)的分析數(shù)據(jù)，則實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)率提高，每個(gè)樣本的分析成本降低。ACQUITY UPC2系統(tǒng)是實(shí)驗(yàn)室將目前的正相HPLC方法轉(zhuǎn)換為更高效、更省錢的UPC2的方法的一種理想的解決方案，同時(shí)也增強(qiáng)了健康、安全和環(huán)境方面的保護(hù)。