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快速開發反相固相萃取的方法的建議

放大字體  縮小字體 發布日期:2013-04-02  來源:中國檢測服務網
核心提示:Log P (分配系數)的定義:分配系數是一個非離子化的化合物在兩種不互溶的溶劑中達到平衡后,在每種溶劑中的濃度比例。 一般用水
 Log P (分配系數)的定義:分配系數是一個非離子化的化合物在兩種不互溶的溶劑中達到平衡后,在每種溶劑中的濃度比例。

    一般用水(水相)和辛醇(Octanol疏水的有機溶劑)做為計算化合物分配系數兩種溶劑。就是說,一個化合物加入這兩種混合溶劑內,達到平衡后,然后用UV/Vis來定量計算化合物在每一種溶劑中的量。Log P 的決定是根據下面的方程式。

    Log Poctanol/water=Log (溶質在辛醇的濃度/溶質在水中的濃度)

    這個值可以反應出一個被分析物的親水性和疏水性的程度

    Log P = 1 表示10 :1 有機:水性 (稍稍疏水性)

    Log P = 0表示 1 :1 有機:水性 (親水和疏水性相同)

    Log P = -1表示 1 :10 有機 :水性(稍稍親水性)

    以下提供一些實際的例子, 以 Log P由小變大(疏水性逐漸增加)

    (1)Urea (尿素) Log P = -2.11

    (2)Dopamine(多巴胺) Log P = -0.98

    (3)Atenolol (阿替洛爾) Log P = 0.16

    (4)Picric Acid ( 苦味酸) Log P = 1.33

    (5)Testosterone (睪酮) Log P = 3.32

    (6)THC (四氫大麻醇) Log P = 7.6

    由化學結構可以知道尿素是比睪酮極性大,但是Log P的計算可以定量出尿素比睪酮的極性大100,000 倍。現在讓我們看看如何利用 Log P 來協助我們固相萃取的方法開發。

    最成功的固相萃取的方法是充分利用“開和關”的原則,就是說:是否被分析物能否完全吸附或是完全沒法吸附在固相萃取填料上?一個分析物的Log P 是回答這個問題的很好的工具,特別是在反相固相萃取的方法開發。

    (1)當使用Strata X(高分子基質)時, 基本原則是這填料可以吸附非離子化化合物的Log P大于-1.0
    (2)當使用 Strata- C18-E(硅膠基質)可以吸附非離子化合物的Log P大于+ 1.0
    所以說,Strata-X可以被用來吸附稍帶極性的化合物。我們再進一步舉個實例,上面提到的化合物中,尿素的Log P 是-2.11 ,就沒辦法使用Strata-X 或是 Strata-C18-E。同樣的,多巴胺和阿替洛爾,沒法使用Strata-C18-E, 因為這兩個化合物的Log P都是小于+1.0。Log P 也可以用來決定在反相固相萃取方法開發時要使用多強的溶劑來清洗。Log P愈高時意味著可以被吸附的很強,就可以用較激烈的方法來清洗。  

    例如說使用Strata-X時,睪酮可以用60% 的甲醇來清洗。 這也可以說是預料之中,因為睪酮是非常大的疏水性化合物,它的Log P是3.32 (如果需要睪酮的固相萃取的方法,可以和我們索取編號–TN-0017)。

    總之, 一個化合物的Log P是很好固相萃取方法開發的“指南針”。 
    當然Log P只是其中的一個指導參數,我們在開發方法時還是不能忽略被分析物的其他性質,如此才能夠全方位的考慮到所有性質已建立出最好的方法。

編輯:songjiajie2010

 
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關鍵詞: 反相固相萃取
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