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食品中蛋白質的測定——問題匯總及解答

放大字體  縮小字體 發布日期:2022-05-30
核心提示:對于比較普遍的蛋白質檢測我們匯總了大家的問題,進行答疑:一、當測定的樣品是液體時,也是稱取質量嗎?樣品取體積還是稱質量要
對于比較普遍的蛋白質檢測我們匯總了大家的問題,進行答疑:

一、當測定的樣品是液體時,也是稱取質量嗎?
樣品取體積還是稱質量要看執行標準中的限量單位。如果限量單位是體積則取體積,是質量則稱質量。
二、測定液體時稱樣量能不能減少到5g?
主要看樣品的蛋白質含量,控制稱取的樣品含氮量在30mg~40mg是比較合理的。

三、玉米淀粉的稱樣量是多少?

玉米淀粉中蛋白質含量很低,滴定法更適用于蛋白質含量為常量的樣品,不適合這種微量樣品的檢測。

四、消化過程中硫酸銅、硫酸鉀加多加少有影響嗎?
催化劑的添加量要求不是特別嚴格,其添加量稍有偏差對結果的影響不大,但不要過多或過少。

五、全自動凱氏定氮儀測定蛋白質怎樣才能消化完全?
控制樣品稱樣量在合理范圍。原則上樣品越少,越容易消化,但樣品量太少計量的誤差會變大。所以要控制稱取的樣品量使其含氮量在30mg~40mg是比較合理的。

消化劑的添加要足夠。比如在硫酸不足的情況下,過多的硫酸鉀會形成硫酸氫鉀而不與氨作用,因此當硫酸過多被消耗或樣品中脂肪含量過高時,可適度增加硫酸的量。

六、自動凱氏定氮法中指示劑甲基紅和溴甲酚綠是1:5的配比,配比稍有變化影響大嗎?
國標中給的兩種指示劑,其中B指示劑的配比是甲基紅乙醇溶液與溴甲酚綠乙醇溶液的配比為1:5。指示劑的比例不同,顏色會有變化,對結果影響不大,主要配合試劑空白的顏色反應來看反應結果。
七、自動凱氏定氮和凱氏定氮是不是用的氫氧化鈉溶液濃度不一樣?
一樣的,都是使用400g/L的氫氧化鈉溶液。
八、蒸餾過程中,火力控制在多大?
能保證液體沸騰,且產生的蒸汽充足、均勻即可。

九、蒸餾過程中,總是倒流怎么辦?

要保證蒸餾裝置不漏氣,使用前進行裝置的檢漏。

蒸餾時,要保證蒸汽均勻、充足,中間不能停止加熱或減小火力,防止產生倒吸。

蒸餾完畢后先將冷凝管下端提離頁面,蒸餾1min后取下接收瓶,最后關掉熱源,否則可能會發生倒吸。

十、蒸餾過程中,反應液為什么跑到反應室外層?

當熱源不夠穩定,提供的蒸汽不均勻時會導致此現象的產生。比如停火或者加熱的溫度降低時,由于反應室外層的壓力突然降低,可使液體吸入反應室外層,所以操作時一定要保證加熱產生的蒸汽充足、均勻。

十一、加了指示劑的硼酸可以保存多久?

混合指示劑需要臨用現配,不建議長期保存。

十二、含乳飲料的蛋白質折算系數用哪個?

含乳飲料的蛋白質折算系數要看飲料中的蛋白質來源,如果來源僅為純乳或純乳制品,則蛋白質用6.38。如果飲料中蛋白質來源較多用6.25。

十三、蛋白質測定偏低的原因?蛋白質的稱樣量過多會導致蛋白質偏低嗎?
導致蛋白質測定偏低的原因較多:樣品消化不完全、裝置漏氣導致氨的溢出、操作不當、稱樣量不合理等均會導致結果偏低。

稱樣量過多會造成結果偏低。主要還是要看樣品,提前預估蛋白質含量,從而掌握合理的稱樣量。一般控制蛋白質含量在0.2g左右,加入0.4g硫酸銅、6g硫酸鉀及20mL濃硫酸是比較合理的消化方法。

十四、怎么驗證蛋白質測定的準確性?
檢查精密度,平行樣的絕對差值不超過算數平均值的10%。

也可以通過儀器比對、人員比對、留樣再測、加標回收等方式驗證結果的準確性。
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編輯:songjiajie2010

 
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