高效液相色譜儀直接分析氨基酸物質:
樣品:12種未衍生氨基酸混合物溶液(1mMol/L)
色譜儀:“上海吉理LC600”液相色譜儀,四元梯度泵
配有二極管陣列檢測器、蒸發光散射檢測器和化學工作站
檢測器:500型ELSD蒸發光散射檢測器
漂移管溫度為95℃,氮氣流速2.5L/min
色譜柱:AlltimaC18,5μm,柱長25cm,柱徑4.6mm
流動相:A為含0.1%TFA的水
B為含0.1%TFA的乙腈
梯度:時間0min5min20min
A液100%100%60%
B液0%0%40%
流速:0.6mL/min
進樣:20μL
結果:所有組分在25min之內全部流出,各組分完全分離,組分流出順序為:峰1為絲氨酸,峰2為賴氨酸,峰3為谷氨酸,峰4為精氨酸,峰5為脯氨酸,峰6為纈氨酸,峰7為甲硫氨酸,峰8為酪氨酸,峰9為異亮氨酸,峰10為亮氨酸,峰11為苯丙氨酸,峰12為組氨酸。
一、LC—P600型高壓恒流泵
柱塞桿采用浮動導向結構,驅動凸輪由高強度合金鋼制造。采用微處理器控制微步驅動電路,使得驅動泵的步進電機運行平穩、噪聲低、速度調節范圍大。LC-P600高壓恒流泵在壓力為0~42Mpa的范圍內,流量可以從0.001mL/min開始到9.999mL/min。這樣滿足了常規分析到微流量分析的需要。
在單泵等度分析時,可根據該儀器上全漢字顯示液晶屏的提示語句,通過四個功能鍵就可變換各種操作模式,并且可以方便地設置流量、壓力上下限、持續工作時間、壓力單位等參數。
LC-P600高壓恒流泵具有過程監測功能。微處理器實時控制泵的流量和檢測輸液壓力。在壓力超限的情況下,報警并自動停止泵的運行。
可采用LC-WS100工作站,通過RS232接口,控制多達四臺泵的運行,建立多元梯度分析系統。
LC-P600高壓恒流泵整體結構采用模塊化設計,包括機械部分和電路部分都可以獨立裝拆,因此故障檢查和調換都非常方便。
LC-P600高壓恒流泵采用雙柱塞并聯泵結構,雙泵頭交替輸液。在同樣輸液量的情況下,它的輸出脈動要比串聯泵低得多,而活塞桿和密封圈壽命要比常規串聯泵長一倍。
二、LC—UV600型紫外檢測器
LC-UV600紫外檢測器采用了平行的雙錐孔流通池,樣品池和參照池完全處于對等的條件。錐孔設計的流通池,可以在同樣的池體積情況下,提高通過池孔的光能量,明顯降低了儀器的靜態噪音和信號漂移。
光路系統采用了精密定位結構,所以精度高、偏移小。氘燈座和光路系統采用熱隔離安裝技術,降低了儀器的穩定時間,并且使氘燈的發熱對光路系統的影響降到最低。
控制電路采用多微處理器結構,分別管理信號采集、數據處理、系統控制和通信。LC-UV600紫外檢測器在做等度分析時,可以方便地通過全漢字的液晶屏與七個功能鍵,設置紫外光波長、濾波常數、輸出量程、運行時間等參數。并且可以實現開關氘燈、光譜掃描、啟動分析程序等功能。
該儀器的另一大特點是:LC-UV600紫外檢測器獨特地使用了數字信號直接輸出的線路結構。相比以往的紫外檢測器色譜信號大多數采用模擬信號輸出或者是內部數字信號處理后,再轉換成模擬信號輸出到色譜數據處理裝置,然后再經過模數轉換。這樣多重的轉換勢必導致信號畸變和干擾。而LC-UV600紫外檢測器通過RS232接口將數字化信號毫無損失地送到LC-WS600工作站進行對數轉換和積分處理。
LC-UV600紫外檢測器可以通過LC-WS600工作站上的圖形化界面,方便地實現控制氘燈開關、光譜掃描、繼電器開關、波長掃描等功能。