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銀杏葉含量測(cè)定方法(槲皮素、山奈素、異鼠李素)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2007-05-14


   銀杏葉為銀杏科植物銀杏Ginkgo biloba L.的干燥葉。2005版《中國藥典》一部采用高效液相色譜法,以槲皮素、山奈素、異鼠李素為對(duì)照,測(cè)定總黃酮苷的含量。

    一、高效液相色譜法

    2005版《中國藥典》銀杏葉含量測(cè)定項(xiàng)下:

    色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不得低于2500。

    供試品溶液的制備:取本品中粉約1g,精密稱定,置索氏提取器中,加三氯甲烷回流提取2小時(shí),棄去溶劑,藥渣揮干,加甲醇回流提取4小時(shí),提取液蒸干,殘?jiān)蛹状?25%鹽酸溶液(4:1)混合液25ml,加熱回流30分鐘,放冷,轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中,并加甲醇至刻度,搖勻,即得。

    用HPLC法測(cè)定銀杏葉總黃酮苷的含量時(shí),常用的流動(dòng)相系統(tǒng)為甲醇-磷酸系統(tǒng)。

    ①日本島津LC-6A系列高效液相色譜儀;色譜柱為YWG-C18(10μm,25cm×4.0mm);流動(dòng)相:甲醇-水(含0.4%磷酸)(52:48);檢測(cè)器:紫外光檢測(cè)器;波長(zhǎng)360nm;柱溫30℃。

    ②Waters高效液相色譜儀;色譜柱為Novaplal C18(300mm×3.9mm,4μm);流動(dòng)相:甲醇-水(50:50),磷酸調(diào)pH為2.5;檢測(cè)波長(zhǎng)360nm;柱溫40℃。

    ③Waters高效液相色譜儀;色譜柱為Spherisor Rb-18(10μm,250×4mm);流動(dòng)相:甲醇-水-磷酸(55:44.5:0.5);柱溫25℃;檢測(cè)波長(zhǎng)370nm。

    ④島津LC-6A高效液相色譜儀;C18柱(10μm,3.9mm×300mm);流動(dòng)相:甲醇-0.5%磷酸水溶液(48:52);檢測(cè)波長(zhǎng)368nm。

    其它如:袁龍測(cè)定銀杏葉片劑總銀杏黃酮的含量,采用島津LC-10A VP高效液相色譜儀;色譜柱為Hypersil ODS 柱(205mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:磷酸緩沖液(pH2)-四氫呋喃-甲醇-異丙醇(60:15:10:15);檢測(cè)波長(zhǎng)380nm.

    池靜端等用反相高效液相色譜法測(cè)定了銀杏葉中槲皮素、異鼠李素、山萘酚等6種黃酮成分的含量。采用HP1090型高效液相色譜儀;色譜柱為Zorbax ODS C18 柱(150mm×4mm,5μm);流動(dòng)相:A.MeOH, B.四氫呋喃(THF)-H2O-HCOOH(34:65:1),梯度洗脫;;檢測(cè)波長(zhǎng)350nm;柱溫25℃。以單酚酸B(salvianolic acid B)為內(nèi)標(biāo)。銀杏葉用丙酮和鹽酸混合溶液回流提取。

    二、毛細(xì)管電泳法

    佘佳紅等以超臨界流體萃取(SFE) 銀杏葉粗提物中槲皮素和山奈素, 以膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法(MECC) 測(cè)定這兩種成分的含量。SFE條件:壓力42mPa;溫度60℃;改性劑0.2ml乙醇;動(dòng)態(tài)萃取體積4ml;靜態(tài)萃取時(shí)間4min;接收液乙醇。膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜條件:空心熔融石英毛細(xì)管柱(55cm×75μm);電壓18kV;緩沖液的終濃度25mmol/L NaH2PO 46.25mmol/L-Na2B4O7;SDS 35mmol/L;pH8.5;溫度29℃;檢測(cè)波長(zhǎng)254nm;進(jìn)樣時(shí)間8s。

 
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