1.首先人員操作誤差。我們是上市公司，實(shí)驗(yàn)室的人一個(gè)微生物檢驗(yàn)人員都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格考核的，微生物檢驗(yàn)工作都有4到5年的操作檢驗(yàn)，且出現(xiàn)污染后QC主管也一直在旁邊觀察了實(shí)驗(yàn)人員的操作，并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有任何異常。因此可以排除人員操作誤差。

2. 設(shè)備和環(huán)境誤差。我們用于微生物檢驗(yàn)的都是要求用可循環(huán)利用的經(jīng)過(guò)嚴(yán)格濕熱霉菌后再烘干的玻璃移液管、玻璃培養(yǎng)皿，無(wú)菌操作是在嚴(yán)格消毒后的生物安全柜中進(jìn)行，且我們微生物限定室的級(jí)別是10萬(wàn)級(jí)，所用的培養(yǎng)箱是滅菌消毒過(guò)的另外2臺(tái)培養(yǎng)箱，相同條件下所得檢品，一半導(dǎo)致培養(yǎng)，一半正置培養(yǎng)，但是正置培養(yǎng)的還是出現(xiàn)了污染，倒置培養(yǎng)的沒(méi)有被污染，真菌長(zhǎng)的均勻有規(guī)則。由此設(shè)備和環(huán)境的誤差也可以排除在外。

3. 物品誤差。由于我們一直都是用生理鹽水、培養(yǎng)基，且都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格濕熱滅菌，高壓滅菌鍋也是經(jīng)過(guò)當(dāng)?shù)厮幈O(jiān)局校準(zhǔn)過(guò)的，且滅菌時(shí)間的調(diào)整在培養(yǎng)基性質(zhì)要求范圍內(nèi)，即排除了檢測(cè)用品的誤差。

綜合以上可以得出培養(yǎng)方案是造成污染的主要原因，隨即與當(dāng)?shù)厮幈O(jiān)局取得聯(lián)系，經(jīng)溝通藥監(jiān)局對(duì)真菌的培養(yǎng)也是開(kāi)始實(shí)施2016版的方法正置培養(yǎng)，且沒(méi)有出現(xiàn)蔓延的情況，藥檢所是將平板一個(gè)一個(gè)擺開(kāi)正置培養(yǎng)，而沒(méi)有疊起來(lái)培養(yǎng)。

我們將平板一個(gè)一個(gè)擺開(kāi)正置培養(yǎng)迅速做了驗(yàn)證：我們將受污染的培養(yǎng)箱做了消毒滅菌，同時(shí)開(kāi)啟了另外2臺(tái)沒(méi)有被污染的培養(yǎng)箱將需要做霉菌培養(yǎng)的含樣品的凝固平板分別放到2臺(tái)培養(yǎng)箱做分開(kāi)擺放正置培養(yǎng)及堆疊擺放正置培養(yǎng)，我們的實(shí)驗(yàn)室的6臺(tái)培養(yǎng)箱都是經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的且都是同型號(hào)的生化培養(yǎng)箱，所以設(shè)備影響因素可以忽略，在培養(yǎng)擺放方式改變，其他基數(shù)不變的條件下培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是一個(gè)一個(gè)擺開(kāi)正置培養(yǎng)的沒(méi)有受污染，而堆疊擺放正置培養(yǎng)的受到了污染。所以可以確定平板的擺放方式是造成污染的原因。

堆疊正置培養(yǎng)造成污染的原因分析：2016版方法要求培養(yǎng)皿正置培養(yǎng)在培養(yǎng)的第3天開(kāi)始需要每天觀察和記錄培養(yǎng)結(jié)果，正置培養(yǎng)可以避免在觀察時(shí)反轉(zhuǎn)使霉菌的孢子抖動(dòng)散落到培養(yǎng)基上而產(chǎn)生的次生菌落。我們都知道霉菌的特性就是有蔓延性，且由于培養(yǎng)箱加熱，培養(yǎng)箱內(nèi)部還有風(fēng)機(jī)使內(nèi)部氣流在旋轉(zhuǎn)，2016版如果堆疊放置正置培養(yǎng)，且有一個(gè)樣品是有霉菌，那么菌絲就會(huì)通過(guò)縫隙拼命的往上爬，就像爬山虎一樣，開(kāi)心的長(zhǎng)著，且隨著生長(zhǎng)孢子會(huì)脫落且特別輕，培養(yǎng)箱風(fēng)機(jī)吹出的風(fēng)把孢子吹散，停到蓋子上甚至通過(guò)蓋子之間的縫隙（蓋子沒(méi)有裝培養(yǎng)基比較輕）污染了其他的樣品，但是同一疊隨著菌絲的蔓延，通過(guò)培養(yǎng)皿直接蔓延到另外一個(gè)培養(yǎng)基上，一個(gè)蔓延一個(gè)，那么一疊被污染的情況會(huì)更嚴(yán)重，這也就驗(yàn)證了我前面提到的同一疊同一個(gè)方向被污染的現(xiàn)象。并不是所有的企業(yè)實(shí)驗(yàn)室都有好幾個(gè)培養(yǎng)箱的，所以就提醒一些微友們，2016版的方法千萬(wàn)不要將霉菌堆疊培養(yǎng)，如果空間不夠可以在培養(yǎng)箱多裝幾個(gè)隔層，問(wèn)題就解決了。

如果培養(yǎng)箱被污染了，可以用75%酒精和新潔爾滅兩種消毒劑對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行了全面的消毒，且大家最好是買那種有紫外消毒、臭氧消毒的培養(yǎng)箱，且消毒完最好不要馬上用，消毒完最好放個(gè)幾天在使用。