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實驗室新發感染檢測方法及發展

放大字體  縮小字體 發布日期:2022-05-17
核心提示:HIV-1新發感染率的估算方法主要有隊列研究、數學模型和實驗室方法。其中實驗室方法主要是通過檢測HIV 感染者樣本中HIV-1抗體陽轉

HIV-1新發感染率的估算方法主要有隊列研究、數學模型和實驗室方法。其中實驗室方法主要是通過檢測HIV 感染者樣本中HIV-1抗體陽轉后的免疫標志物來區分是否為新發感染,進而計算發病率。本文簡要介紹實驗室檢測HIV-1新發感染的方法及發展過程。


1998年,美國研究人員基于人體感染HIV后產生的抗體滴度隨感染時間延長而升高的原理,在HIV抗體初篩實驗的基礎上,建立了低敏酶聯免疫法(less-sensitiveenzyme immunoassay,LS-EIA),又名“確定HIV新發感染的血清學檢測規程”(serologic testing algorithm for recent HIV seroconversion,STARHS)。美國疾控中心采納此法,商品化的試劑(3A11-LS和Vironostika-LS)開始用于H1V-1新發感染檢測及監測。此方法檢測時需要將樣本稀釋1:20000 ,其包被抗原也單一,存在著實驗不易操作,準確度相對低,僅適用于B亞型等缺點。


為了解決低敏酶聯免疫法的局限性,2001年美國疾控中心根據HIV IgG抗體在總抗體中所占比例隨感染時間延長而逐漸增加的特性,將HIV的B、E和D等多個亞型的gp41合成肽連接起來作為抗原,從而建立了BED-捕獲酶聯免疫試驗(BED capture enzyme immunoassay,BED-CELA)。該方法操作簡便,具有良好的穩定性,對HIV-1的A、B、C、D和E亞型均適用。我國于2005年底引入了該方法用于HIV-1發病率估算。此方法受CD4細胞計數、病毒載量值、抗病毒治療等因素影響較大,會導致HIV發病率的高估,因此使用該方法需要排除一些影響因素,如CD4細胞計數<200個/μl和接受抗病毒治療人群。


抗體親和力作為抗體自身的一種屬性,所受影響因素相對于BED-CELA較少,根據HIV-1感染者血清陽轉后抗體親和力會隨著感染時間延長而逐漸增加的原理,建立了雙孔親和力指數(AI)方法和單孔的限制性抗原親和力酶聯免疫試驗(Limiting antigen acidity enzyme immunoassay,LAg-avidity EIA)。2001年研究人員發現應用親和力試驗可以用來識別HIV新發感染,該方法最早使用的是商品化親和力指數試劑盒——AxSYM親和力指數法,隨后美國疾病預防控制中心在2010年用大腸桿菌表達了一種高親和力基因重組gp41抗原(recombinant immunodominant region of gp41 of HIV-1group M,rIDR-M),由此研發了特異性高,估算結果更為準確的限制性抗原親和力酶聯免疫實驗,應用于HIV-1發病率的估算。2013年,我國研發的HIV-1新發感染檢測試劑盒(限制性抗原親和力法)應用于HIV-1發病率檢測,和國外試劑相比,該方法的窗口期和誤判率更適用于我國人群。


由于多種因素的影響,上述實驗室新發感染檢測方法均不能用于個體診斷,僅僅用來分析不同人群的新發感染率,或同一人群不同時間新發感染率的變化趨勢,從而評價干預是否有效,為制定精準的預防和干預策略提供參考數據。 
編輯:songjiajie2010

 
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