色譜法是一種常見的分離技術,其原理是利用欲分離組分在兩相間具備不同的分配系數,以流動相對固定相中的混合物進行洗脫,混合物中的不同物質以不同速度沿固定相移動,最終達到分離的效果。
按兩相的物理狀態,可以分為氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC),在現代樣品分析中,氣相色譜和液相色譜都是普遍采用的分析方法,但兩者也存在許多不同之處,具備不同的特性,這些特性也決定了它們不同的應用范圍。
一、GC與LC的主要差異
1. 流動相區別
GC:流動相為惰性氣體,流動相與組分無親合作用力,只與固定相有相互作用。
LC:流動相為液體,流動相與組分間有親合作用。
2. 色譜柱長度區別
GC:色譜柱長度在幾米到幾十米不等。氣相色譜由于載氣的相對分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動性好,組分在氣相中流動速度快,因此可以增加柱長,以提高柱效。
LC:色譜柱通常在幾十到幾百毫米。
3. 分析樣品選擇性
GC:相對分子質量較小(一般小于1000),低沸點(一般小于500℃),易揮發,熱穩定性。
LC:更適用于分析高沸點,難揮發,熱穩定性差,分子質量較大(1000 - -2000)的液體化合物。
據統計,氣相色譜能分析的有機物只占全部有機物的15%-20%,其可分析樣品的范圍小于液相色譜,但隨著近幾年技術的更新,如頂空進樣和裂解進樣等,進一步擴大了氣相色譜的分析范圍。
4. 檢測器差異
GC:氫火焰離子化檢測器(FID),熱導檢測器(TCD),電子捕獲檢測器(ECD),火焰光度檢測器(FPD),氮磷檢測器(NPD)。
LC:紫外檢測器,熒光檢測器,示差折光檢測器。
5. 其他方面
GC:需要將樣品在氣化室氣化,需要較高的檢測溫度,采用尖頭進樣針。
LC:不必對樣品氣化,常溫即可檢測,采用平頭進樣針。
二、GC與LC的主要相同點
最基本的原理相同,都是吸附-脫附平衡,利用組分在固定相和流動相中的分配系數不同達到分離的目的。也就是說,兩者都是利用物質在流動相和固定相中的分配系數的差別,從而在兩相間反復多次(1000-1000000次,甚至更多)的分配,使原來分配系數差別很小的各組分分離開來。在本質上,都是利用“相似相溶”原理,利用色譜柱進行分離。
三、小結
氣相色譜具有分離效率高,分離速度快,樣品用量少,選擇性好,檢測靈敏度高等特點,在食品、環境、化工等領域都具有廣泛的用途;液相色譜分析范圍廣,對于難分離混合物的分析具有很好的準確性,樣品回收容易,因此液相色譜不僅僅作為一種分析方法,也作為一種分離手段應用在食品醫藥等行業。