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金黃色葡萄球菌的檢驗

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-05-13
核心提示:  我們以SN標準中的最近似值(MPN)測定法來進行講解:   附:MPN方法簡介  這種方法適用于檢測認為帶有大量競爭菌的食

  我們以SN標準中的最近似值(MPN)測定法來進行講解:

   附:MPN方法簡介

  這種方法適用于檢測認為帶有大量競爭菌的食品及其原料和未經(jīng)處理的食品中的少量金黃色 葡萄球菌。

1、樣品制備:

  固體或半固體食品: 以無菌操作稱取25g樣品,放入裝有225mL滅菌生理鹽水的滅菌均 質(zhì)杯內(nèi),于8000r/min均質(zhì)1~2min,制成1:10樣品勻液。
  液體食品: 用滅菌吸管吸取25mL樣品,放入裝有225mL滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶內(nèi) (瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠),經(jīng)充分振搖制成1:10樣品勻液。
  供計數(shù)檢驗時,可按十進位遞增稀釋法將樣品勻液再進行適當(dāng)稀釋。

2、選三個連續(xù)稀釋度,從每個稀釋度分別取1 mL稀釋樣品液,接種3管含10%氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯。樣品的最高稀釋度必須達到能獲得陰性終點,置36±1℃培養(yǎng)48 h。

3、用3 mm接種環(huán),從有細菌生長的各管中移取1 環(huán),劃線接種于表面干燥的Baird- Parker瓊脂平板,置36±1℃培養(yǎng)45~48h。

  附:怎樣在平板上進行細菌的劃線分離。

4、從有細菌生長的每一平板上至少挑取1個可疑金黃色葡萄球菌菌落,移種到肉湯培養(yǎng)基中,置36±1℃培養(yǎng)20~24 h。

  附:金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)-1
    金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)-2
    金黃色葡萄球菌在甘露醇高鹽平板上的菌落

5、取肉湯培養(yǎng)物0.3mL同0.5mL凝固酶試驗兔血漿于8mm×100mm試管內(nèi)充分混合,置 36±1℃培養(yǎng),定時觀察是否有凝塊形成,至少觀察6 h,以內(nèi)容物完全凝固,使試管倒置或 傾斜時不流動者為陽性。試驗中需同時做巳知陽性和陰性對照。對可疑結(jié)果,應(yīng)進行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗{如耐熱核酸酶試驗等} 加以證實。

  附:金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗

6、報告結(jié)果:根據(jù)凝固酶試驗結(jié)果查最近似值(MPN)表,報告金黃色葡萄球菌 的MPN/g (mL)。

 

  附:國家標準:GB/T4789.10-2008 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗

    行業(yè)標準:SN0172-92:出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法

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