但胚胎移植技術科技含量高，投資成本大，使該技術在國內(nèi)畜牧良種繁育方面應用力度不大，移植妊娠率相對不高，制約了畜牧良種繁育推廣和畜牧業(yè)快速發(fā)展。

 

　　陜西省布爾羊良種繁育中心從1998年開始，連續(xù)引進泰國、澳大利亞、南非等國外胚胎生物工程專家，與西農(nóng)大專家合作開展山羊胚胎移植上千例，取得了很好的成果。從供體和受體的選擇，供體的超排，受體同期化發(fā)情處理，胚胎回收、沖洗、鑒定，受體移植，受體羊的飼養(yǎng)等方面做了深入研究，總結(jié)出提高山羊胚胎移植成功率的主要因素。

 

選擇優(yōu)秀的供體和受體

 

　　供體 選擇表現(xiàn)型好、生產(chǎn)水平高、遺傳性穩(wěn)定、體質(zhì)健康、發(fā)情周期正常、無生殖道疾病、有1胎~2胎正常繁殖史的2歲~5歲青壯年羊做供體。

 

　　受體 要求體形大、無生殖道疾病、產(chǎn)奶量高、哺乳力強的空懷母羊為受體，受體羊年齡2歲~5歲且有1胎~2胎正常繁殖史。供體和受體羊的比例一般為1∶10~1∶12為宜。

 

加強供體和受體羊的飼養(yǎng)管理

 

　　供體和受體羊在手術前3個月~4個月必須全部選留到位，并做好疫病的預防接種及必要的疫病監(jiān)測及驅(qū)蟲等工作。從術前2個月加強飼養(yǎng)，將日糧中的蛋白質(zhì)逐漸提高到20%~30%，要求羊身體健康，中上等膘情，防止過肥或過瘦。供體羊特別在處理期間及受體羊胚移后不能突然改變飼養(yǎng)環(huán)境、飼養(yǎng)方式及飼養(yǎng)標準，避免長途運輸、意外驚嚇等應激影響導致羊不排卵、胚胎退化及死亡，影響移植受胎率。

 

選擇適宜的胚胎移植季節(jié)

 

　　山羊胚胎移植最佳適宜的季節(jié)為8月~10月。7月羊處于發(fā)情初期，出現(xiàn)發(fā)情不排卵的比率較高，11月移植所產(chǎn)生的羔羊在次年4月其成活率及生長速度較低。應避開最熱和最冷的季節(jié)，氣溫高于32℃，移植成功率較低。另外，陰雨天對移植成功率也有一定影響，應盡量避開。

 

使用最佳藥品，準確把握劑量

 

　　胚胎移植技術在國內(nèi)運用規(guī)模尚小，沒有專門生產(chǎn)胚胎移植藥品的廠家，目前國內(nèi)使用的胚胎移植藥品大部分都是科研單位自己研制，沒有大量應用臨床實踐。選擇進口藥物釋放性能好，效價穩(wěn)定，筆者在胚胎移植過程中，多年使用進口硅膠陰道栓，其操作方法簡單，處理效果好，受到國內(nèi)專家好評。筆者總結(jié)出胚胎移植采用21天藥物處理程序，在第9天換栓1次，注射加拿大生產(chǎn)的FSH（Foltropin-r），劑量為200毫克~300毫克為宜，臂部肌肉分4天8次遞減注射，PMSG劑量以200IU為宜，受體同期發(fā)情利用率可達87.7%，撤栓時間受體應比供體早撤栓12小時。供體羊注射PMSG劑量大則產(chǎn)生的未受精卵多，發(fā)情持續(xù)時間長。

 

做好供體羊配種及受體羊試情記錄

 

　　發(fā)情測定以供受體羊開始接受爬跨時間到拒絕接受爬跨時間為準，以6小時~8小時進行1次測情，一般用結(jié)扎輸精管后3個月的試情公羊測情，供體配種采用人工授精與公羊本交相結(jié)合的方式進行，間隔6小時配種1次，胚胎有效利用率為99.8%，從發(fā)情開始至發(fā)束為止，一定要做好詳細的登記。

 

抓好胚胎移植術前的消毒工作

 

　　手術前對手術器械進行高壓（15磅壓力30分鐘）、干熱（每小時220℃）滅菌，場地用紫外線照射30分鐘，噴灑消毒劑進行手術場地及環(huán)境消毒，手術過程做到無菌操作。手術前受體禁食24小時，限量飲水，以防止手術前腹壓過大，造成手術困難和羊生殖道的損傷。

 

選擇正確的沖胚方法

 

　　供體采胚多采用手術沖胚法進行，子宮角采集胚胎應于配種后6天~6天半進行，輸卵管沖胚法在配種后2天~3天進行；麻醉以國產(chǎn)藥品846合劑肌肉注射進行全身麻醉，同時準備國產(chǎn)速醒靈解麻藥品進行解救以防意外；手術部位利用電動剪進行剪毛，5%的碘酊消毒，切口應在乳房前腹中線兩側(cè)2厘米~3厘米處手術切口，以提高羊可手術次數(shù)，創(chuàng)口以3厘米~4厘米為宜；當摸到子宮角或卵巢后不要強抓，用食指和中指輕輕夾住子宮角或輸卵管，緩慢牽引出切口外，不可用力過大或觸壓卵巢；進行子宮角沖胚，沖胚液以20毫升~30毫升為宜，沖胚管（進口）氣囊注入空氣為3毫升~4毫升；沖洗干凈手術部位的血凝塊，向腹腔內(nèi)注入含青鏈霉素的溫熱生理鹽水250毫升~500毫升，將子宮角或輸卵管完全還納腹腔后，檢查腹腔有無異物，然后進行腹膜縫合，依次為肌肉、皮膚縫合，皮膚涂紅霉素軟膏。

胚胎質(zhì)量鑒定

 

　　將沖出的胚胎倒入檢卵皿內(nèi)，在顯微鏡下進行檢查，評定等級，按其質(zhì)量分為A、B、C三級，將C級胚胎及未受精卵、死胚、變性胚胎等不可用胚胎棄掉。一般根據(jù)受體羊黃體發(fā)育程度進行1枚~3枚移植。盡量將兩枚胚胎同時移植入有黃體的同側(cè)子宮角內(nèi)。據(jù)測定，其胚胎成活率為70.5%，明顯高于移植1枚的成活率（62%）。

 

胚胎質(zhì)量與移植方法

 

　　將胚齡為6天~6天半胚胎移入同步發(fā)情±12小時(9.74±2.85)的受體子宮角內(nèi)，此時大多為早期囊胚或囊胚，其受胎率及產(chǎn)羔率也較高，桑椹胚受胎率52.6%(81/51)，產(chǎn)羔率85.6%(101/118)；早期囊胚受胎率59.4%(19/32)；產(chǎn)羔率88.5%(23/26)；擴張囊胚的受胎率66.2%（43/65)，產(chǎn)羔率78.3%(65/83)；囊胚受胎率57.7%(45/78)，產(chǎn)羔率98.5%(58/59)；孵化胚受胎率52.2%(24/26)，產(chǎn)羔率81.8%(27/33)。由此可見，胚胎質(zhì)量的好壞，對受胎率影響很大。采用腹腔鏡進行移植，其特點是創(chuàng)口小，移植速度快，術后感染率低，一般手術熟練者移植1只需1分半鐘~3分鐘，每天可移植120只~150只，鮮胚妊娠率為60%~80%，術后感染率為5%以下，可以有效地節(jié)約時間，提高受胎率。

 

飼養(yǎng)管理與妊娠診斷

 

　　由于移植后的受體羊身價倍增，應加強飼養(yǎng)管理，給予營養(yǎng)豐富的飼草飼料，避免因驚嚇、急趕、突然改變飼養(yǎng)環(huán)境、喂冰凍飼料及飲水等引起的應激反應造成胚胎早期死亡和胚移羊中后期流產(chǎn)，應加強飼養(yǎng)管理；利用B超儀器進行早期診斷，對懷孕胚胎移植羊按移植時間、批次以35只為單位組群，安排責任心強的人員管護飼養(yǎng)，每天檢查1次~2次傷口，發(fā)現(xiàn)傷口感染盡早處理。移植后兩個情期再進行妊娠診斷：一般以2個情期未返情或用試情羊放入測情進行鑒定，借助超聲波掃描儀進行確診，及時處理空懷羊，給懷孕羊補充胡蘿卜等富含維生素A、D、E的飼草飼料，飼喂全價飼料，補充鈣、磷、鐵、硒等礦物質(zhì)微量元素。

 

　　綜上所述，胚胎移植技術環(huán)節(jié)多，程序復雜，關鍵技術要求嚴格，抓好每個環(huán)節(jié)都很重要，要想取得良好的移植效果，應具備技術過硬的專業(yè)隊伍和責任心強的管理人員，才能使胚胎移植成功率達到更高的水平。