氣相色譜法

　　此方法測得的是食物中各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。樣品處理簡單，快速；方法準(zhǔn)確，靈敏度高。

1.原理
　　氣相色譜法是利用色譜柱中裝入擔(dān)體及固定液，用載氣把欲分析的混合物帶入色譜柱，在一定的溫度與壓力條件下，各氣體組分在載氣和固定液薄膜的氣液兩相相中的分配系數(shù)不同，隨著載氣的向前流動，樣品各組分在氣，液兩相中反復(fù)進(jìn)行分配，使脂肪酸各組分的移動速度有快有慢，從而可將各組分分離開。然后進(jìn)行分別測定。

2.適用范圍
　　此法適用于食物中脂肪酸的分析。

3.儀器
　　氣相色譜儀
　　氫火焰離子化檢測器
　　氮氣 、氫氣、壓縮空氣
　　微處理機
　　色譜柱2m×4mm或3m×4mm填充80--100目ChromosorbW，涂以8% 或10%（W/W）二乙二醇琥珀酸酯（DEGS）
　　氣相色譜條件
　　柱溫:210℃
　　進(jìn)樣器溫度：280℃
　　檢測器溫度：280℃
　　氮氣流速：40ml/cm2

4.試劑
　　所有試劑，如未注明規(guī)格，均指優(yōu)級純，所有實驗用水，均為蒸餾水。
　　（1）石油醚（沸程30～60℃）分析純
　　（2）苯
　　（3）無水甲醇
　　（4）0.4mol/L氫氧化鉀--甲醇溶液：稱2.24g氫氧化鉀溶于少許甲醇中，然后用甲醇稀釋到10ml。
　　（5）脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)（SIGMA）
　　(6) 脂肪酸混合標(biāo)準(zhǔn)
　　CHAIN %BYWT
　　6:0 1.0
　　8:0 5.0
　　10:0 4.0
　　12:0 27.0
　　14:0 10.0
　　16:0 10.0
　　18:0 2.0
　　18:1 15.0
　　18:2 25.0
　　18:3 1.0

5.操作步驟
　　稱取30--100mg（約2-6滴） 油脂，置入10ml量瓶內(nèi)，加入1-2ml 30~60℃沸程石油醚和苯的混合溶劑（1：1），輕輕搖動使油脂溶解。加入1-2ml 0.4mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液，混勻。在室溫靜置5～10分鐘后，加蒸餾水使全部石油醚苯甲酯溶液升至瓶頸上部，放置待澄清。如上清液渾濁而又急待分析時，可滴入數(shù)滴無水乙醇，1-2分鐘內(nèi)即可澄清。吸取上清液，在室溫下吹入氮使?jié)饪s，所得到濃縮液即可用于氣層分析。

6.結(jié)果計算
　　在有微處理機的情況下，用歸一化計算法則可自動打印出峰面積和各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。歸一化計算法不能直接計算脂肪酸的總重量及各種脂肪酸的實際含量。

7.注意事項
　　同一樣品的兩次測定值之差不得超過兩次測定平均值的5%。