在线观看亚洲精品专区-在线观看亚洲免费-在线观看亚洲免费视频-在线观看亚洲欧美-欧美freexxx-欧美free嫩交video

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 
當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 細胞實驗技術 » 正文

細胞周期的測定

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-08
一、原理
細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。
單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。
測定細胞周期的椒ê芏啵?型?凰乇曇欠、细?剖?ǖ齲?飫锝檣芤恢擲?肂rdU滲入測定細胞周期的方法。
BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基后,可做為細胞DNA復制的原料,經過兩個細胞周期后,細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上應表現為一條單體淺染。如經歷了三個周期,則染色體中約一半為兩條單體均淺染,另一半為一深一淺。細胞如果僅經歷了一個周期,則兩條單體均深染。計分裂相中各期比例,就可算出細胞周期的值。
二、儀器、用品與試劑
1、儀器、用品:同常規細胞培養
2、試劑:BrdU(1.0mg/ml),甲醇、冰醋酸,Giemsa染液,秋水仙素,2×SSC液
三、操作步驟
1、細胞生長至指數期時,向培養液中加入BrdU,使最終濃度為10μg/ml。
2、44小時加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。
3、48小時后常規消化細胞至離心管中,注意培養上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。
4、常規染色體制片(見第三部分:染色體技術)。
5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上,鋪上2×SSC 液,距紫外燈管6cm處紫外照射30分鐘。
6、棄去2×SSC液,流水沖洗。
7、Giemsa液染色10分鐘,流水沖洗,晾干。
8、鏡檢100個分裂相,計第一、二、三、四細胞期分裂指數。
9、計算:
細胞周期(Tc)=48/{(M1 2M2 3M3 4M4)/100}(小時)
附:(1)BrdU配制: BrdU 10mg十雙蒸水10ml 4℃下避光保存。
(2)2×SSC配制: NaCl 1.75克,檸檬酸三鈉•2H2O 0.88克,加水至100ml,4℃保存。
 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 5.789 second(s), 1186 queries, Memory 3.37 M
主站蜘蛛池模板: 久久久福利 | 免费人成观看在线网 | 国产午夜精品久久久久九九 | 性欧美xxxx| 日韩一级特黄毛片在线看 | 久久国产美女 | 亚洲综合色婷婷久久 | 色中文字幕| 天天夜夜狠狠一区二区三区 | 久久99国产精品免费观看 | 亚洲xxx视频 | 综合丁香 | 自拍偷拍综合网 | 天天看片中文字幕 | 日韩在线视频一区 | 日本黄色高清视频 | 免费在线观看a | 日本黄色xxxx | 欧美色综合久久 | 色com| 欧美adc影院 | 欧美久久天天综合香蕉伊 | 濑亚美莉iptd619在线观看 | 亚洲国产精品婷婷久久 | 国产成 人 综合 亚洲网 | www午夜| 俺去啦最新网址 | 俺来也婷婷 | 国产一级大片在线观看 | 天天插夜夜操 | 成人免费视频一区 | 三级网站国产 | 天天操夜夜拍 | 99久久99久久精品国产 | 夜恋秀场欧美成人影院 | 天堂网中文字幕 | 欧美白虎逼| 男人和女人做免费做爽爽视频 | 午夜无遮挡怕怕怕免费视频 | 男人操女人免费网站 | 最近观看免费高清视频 |