1．96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)細(xì)胞，去培養(yǎng)液。用0.01mol/L PBS洗滌1次（如為懸浮細(xì)胞則用離心洗滌）。
2．去洗滌液后加入磷酸酶底物100μl/孔。
3．37℃，孵育1～4h。
4．加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。
5．在多孔酶標(biāo)儀上405nm處測光吸收度，將細(xì)胞培養(yǎng)板其中不含細(xì)胞，同樣處理過的一孔作為空白對照，所測的每孔光吸收度可間接反應(yīng)每孔中的細(xì)胞數(shù)。如在同樣條件下作一細(xì)胞數(shù)的系列標(biāo)準(zhǔn)對照，以細(xì)胞數(shù)為X軸，光吸收度為Y軸，可作直線回歸，可推算出每孔中的細(xì)胞。