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MTS檢測細胞生長

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-08

1.培養IL-2依賴細胞株CTLL-2細胞或HT-2細胞(檢測IL-2),或者IL-3依賴細胞株FDC-P1細胞或FL5.12細胞(檢測IL-3)到對數生長期。

2.取96孔細胞培養板,每孔加0.1ml含1×104~2×104上述細胞之一的DMEM培養液(加10%小牛血清)。

3.每孔加0.1ml系列稀釋的待測細胞因子(IL-2或IL-3)樣品或細胞因子標準品,在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養24小時。

4.每孔加20μl MTS/PMS混合液,繼續培養3~4小時顯色。

5.檢測前搖晃培養板10秒鐘,混勻顏色。在酶聯檢測儀上,波長570nm(或490nm,或570nm和690nm)處檢測各孔的光吸收值(OD)。用樣品稀釋度對OD值(OD570、OD490或OD570/OD690)繪制劑量-反應曲線,根據標準品曲線計算樣品中細胞因子的量。


 
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