SD大鼠頸椎脫臼法處死，75%乙醇浸泡1～2分鐘，2次，置超凈臺(tái)內(nèi)，打開腹腔取出腎臟剪碎，置含Hank’s液的無菌培養(yǎng)皿洗滌，置80目不銹鋼篩網(wǎng)上。用扁平自制小鏟輕輕碾磨產(chǎn)物微小組織透過篩網(wǎng)，濾過組織Hank’s液混合物用吸管吸至120目不銹鋼篩網(wǎng)，濾過，去小組織塊，濾過物吸至200目不銹鋼篩網(wǎng)，輕輕濾過，Hank’s液洗滌1次，收集網(wǎng)上腎小球，鏡下觀察為分離良好的腎小球。腎小球用0.2%胰酶、0.1%膠原酶，37℃消化20分鐘，加血清終止胰酶反應(yīng)，離心除去膠原酶。處理過的腎小球計(jì)數(shù)后接種至24孔培養(yǎng)板或25ml培養(yǎng)瓶，使腎小球大于60個(gè)/cm2，加培養(yǎng)基5～10ml（培養(yǎng)基組成：F12—3T3上清1：1；5%馬血清；2.5%胎牛血清；胰島素5μg/ml；25ng/ml氫化可的松；5μg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白；25ng/ml前列腺素E1；甲狀腺素0.02ng/ml；D-纈氨酸150ng/ml）腎小球培養(yǎng)8～10天，去除腎小球未生長(zhǎng)組分，細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)，形態(tài)學(xué)觀察：細(xì)胞生長(zhǎng)成單層多角型細(xì)胞，直徑約100μm。