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核仁組織者區的AgNO3染色

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-08
一、原理
1976年Goodpasture等應用銀染色技術,使9種哺乳動物的核仁組織者區(NORs)特異性的染為黑色,該技術被稱為Ag-As的銀染技術,銀染色陽性的NORs被稱為Ag-NORs,與Hsu等人用原位分子雜交得到的結果比較,表明Ag-NORs就是18S 28S核糖體基因(rDNA)的分布區,后證實染色的不是rDNA基因本身,而是與rDNA轉錄有關的一種酸性蛋白。因此,銀染色的是有轉錄活性的NORs。
二、用品和試劑
染色體制片,水浴鍋。
試劑:50%硝酸銀溶液:5g硝酸銀(AR)溶解在10ml蒸餾水中,保存在鋁箔包裹的玻璃容器內,可穩定保存1年。明膠顯影液∶2g 明膠粉末溶解在99ml蒸餾水中,加1ml甲酸。
三、操作步驟
l.在一培養皿底部放一張蒸餾水潤濕的濾紙,上放兩根竹簽,置水浴內保溫60℃。
2.將玻片標本正面向上平放其上,將50%硝酸銀溶液和明膠顯影液以2∶1體積混勻,立即加至玻片上,覆以蓋片,至玻片標本呈現褐色為止,一般3—4min。
3.自來水流洗去蓋片和染料,空氣中晾干。
4.鏡檢。
四、注意事項
如銀染的染色體形態過淺,可用2% Giemsa復染1—3min.
 
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