（一）蒸汽接種法
準備：先把接種操作室打掃干凈，保持潮濕清潔。準備水壺或鋁鍋1只，煤球爐或電爐1只，接種臺1張，接種針或大鑷子一把。蒸料滅菌桶：用鐵皮做成比鋁鍋口徑小一點的圓桶，桶底放鐵篩架，桶內裝菌袋、瓶。上邊口用塑料紙或木蓋封口。

操作：將煤球爐或電爐放在操作臺旁，再將水壺或鋁鍋放在爐子上面，鍋內裝適量的水，接種工具先放在鍋內煮沸消毒。接種時，關好門窗，洗凈雙手，戴上口罩。將菌種塊直接通過蒸汽放入栽培種的培養料上。在蒸汽上接種，既舒服又方便，且接種質量可靠。因為蒸汽在上冒的過程中產生一股沖力，把水壺或鍋上的空氣排開，蒸汽不斷產生，就形成鍋上一片無菌區。由于菌種得到蒸汽的濕潤，比在酒精燈上接的種恢復得更快，污染也少。另外蒸汽接種不使用化學藥品，可避免在接種時藥品對入體的毒害。

（二）代替瓊脂培養基

1.綠豆粉培養基：將新鮮、干燥、不霉變的豆粉隊放入鍋內煮沸調團狀，裝入試管或三角瓶內，塞好棉塞，用 牛皮紙或報紙包扎好試管上部，成捆放于高壓鍋內，用12公斤／厘米2壓力滅菌半小時，然后慢慢放汽，取出試管凝固成斜面即成。

2.麥粒種：將小麥粒用溫水浸泡2小時，撈出放入竹篩內，4個小時燒一次清水，約24小時左右，麥粒就萌發 小芽約1厘米。這時再放火鍋內煮沸半小時，取出用涼水冷卻后，加入石膏、干馬糞使之成散粒，然后分裝試管、三角瓶、蘑菇瓶、雜酒瓶，裝量按常規。塞好棉塞進行滅菌，15磅壓力滅菌1小時。然后接種。 采用此法可節約大量瓊脂。化學藥品。

（三）于實體組織分離簡易方法

在無菌環境中，直接切取菇體未形成孢子組織塊，進行 培養即稱簡易分離技術。

方法：在第一批菇中，選取具有該品種特性的、發育正常、菌蓋肥厚、朵大、無病蟲害的子實體作種菇。在蒸汽上用手把子實體一分為二，用消毒過的小刀在萌蓋和菌柄交界處切取一小塊菌肉，移放在斜面培養基中央。分離完后標上菌種導和分離時間，然后培養。

還可將于實體菌柄與菌蓋交界處的菌肉，挑一塊直接放 入滅過菌的原種瓶，培養即可。這種菌種也可直接用于栽培或擴接。

（四）以菇種菇的方法

以菇種菇，就是將子實體直接當菌種栽培。方法是：把培養料按常規栽培要求拌勻后，壓塊，在料塊表面放些子實體（子實體要干凈無污染），子實體上撒一層培養料，蓋上塑料紙即可。注意子實體放入后，不能重壓。在20℃以下的低溫培養。

（五）"U"型音提純菌種

常規提純銀耳伴生菌——香灰菌絲，用試管培養基反復提純，手續繁多且不易提純，我們采用玻璃"口"型管提純香灰菌絲，不用瓊脂培養基，就可得到純的香灰菌絲，其方法：取1—2厘米口徑的玻璃"U"型管數支，裝上木屑培養基，兩端用塑料紙包扎嚴（耐高壓塑料紙），滅菌后，在接種箱內，用接種針挑香灰菌絲前端白色處一點，接于"U"管一端，經培養，菌絲長至另一端后，及時挑取一點放入又一"U"型管內，這樣反復進行提純，可獲得純菌絲。

(六）幾種簡易母種培養基的制作

1.缺少土豆時可用米湯或小麥煮水代替

（1）米湯培養基

煮米飯時在鍋中多加些水；將米湯濾在沒有油污的干凈容器內，取1000毫升，倒在小鍋中，加熱煮沸，加入瓊脂20克，攪拌使之溶化，再加入葡萄糖（如無葡萄糖，加白糖亦可）20克，蛋白胨5克（沒有可不加），維生素B1片（10毫克），待藥物全部溶解后，趁熱倒入漏斗內，分裝試管，裝量為試管長度的 1／4，經 15磅壓力滅菌30分鐘，取出；擺成斜面。平菇菌絲在米湯培養基上的生長速度比在PDA培養基上快1倍左右。

（2）小麥汁培養基

取小麥5斤；淘洗干凈，置鍋中，加水煮沸，煮至小麥膨脹而不裂開，中間無白心為度，過濾后取澄清液1000毫升（不足量可加清水補充），在濾液中加入瓊脂20克，葡萄糖或白糖20克，制備方法同米湯培養基，過濾后的小麥粒加入0.5％碳酸粉和1.5％的石膏粉，可用于制作原種培養基，在小麥汁培養基上先后接種平菇、鳳尾菇、香菇、木耳、金針菇，其長勢均比在PDA培養基強。

2.缺少瓊脂時可用玉米粒或米飯作培養基

（l）玉米粒培養基

將玉米顆粒用冷水泡脹，沖成綠豆粒大小碎塊或將嫩玉米粒切碎，裝入試管，裝量為試管的 1／3～1／2，用竹筷稍壓緊，然后塞上棉塞，置高壓鍋內，15磅壓力滅菌45分鐘，取出冷卻后即可作為組織分離或轉接菌種的培養基，將組織塊或菌絲接入其中，25℃左右下培養，7～10天菌絲長滿，菌絲體潔白濃密，擴接成原種，長勢亦好。

（2）米飯培養基

將已濾去米湯即將入瓶的米飯分裝入試管內，稍稍壓緊，使米粒成形，塞上棉塞。滅菌、接種，培養同玉米粒培養基。