一、實驗動物的除毛
在動物實驗中,被毛有時會影響實驗操作與觀察,因此必須除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脫毛等。
(一)剪毛法:剪毛法是將動物固定后,先用蘸有水的紗布把被毛浸濕,再用剪毛剪刀緊貼皮膚剪去被毛。不可用手提起被毛,以免剪破皮膚。剪下的毛應集中放在一容器內(nèi),防止到處飛揚。給狗、羊等動物采血或新生乳牛放血制備血清常用此法。
(二)拔毛法:拔毛法是用拇指和食指拔去被毛的方法。在兔耳緣靜脈注射或尾靜脈注射時常用此法。
(三)剃毛法:剃毛法是用剃毛刀剃去動物被毛的方法。如動物被毛較長,先要用剪刀將其剪短,再用刷子蘸溫肥皂水將剃毛部位浸透,然后再用剃毛刀除毛。本法適用于暴露外科手術(shù)區(qū)。
(四)脫毛法:脫毛法是用化學藥品脫去動物被毛的方法。首先將被毛剪短,然后用棉球蘸取脫毛劑,在所需部位涂一薄層,2~3分鐘后用溫水洗去脫落的被毛,用紗布擦干,再涂一層油脂即可。
適用于狗等大動物的脫毛劑配方為:硫化鈉10g,生石灰15g,溶于100ml水中。
適用于兔、鼠等動物的脫毛劑的配方為:1. 硫化鈉3g,肥皂粉1g,淀粉7g,加適量水調(diào)成糊狀;2. 硫化鈉8g,淀粉7g,糖4g,甘油5g,硼砂1g,加水75ml;3. 硫化鈉8g溶于100ml水中。
二、實驗動物的給藥
在動物實驗中,為了觀察藥物對機體功能、代謝及形態(tài)引起的變化,常需要將藥物注入動物體內(nèi)。給藥的途徑和方法多種多樣,可根據(jù)實驗目的、實驗動物種類和藥物劑型、劑量等情況確定。
(一)注射給藥法
1. 皮下注射 注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚,右手持注射器將針頭刺入,固定后即可進行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或側(cè)下腹部;豚鼠在后大腿內(nèi)側(cè)、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外側(cè)注射,拔針時,輕按針孔片刻,防藥液逸出。
2. 皮內(nèi)注射 此法用于觀察皮膚血管的通透性變化或觀察皮內(nèi)反應。 如將一定量的放射性同位素溶液、顏料或致炎物質(zhì)、藥物等注入皮內(nèi),觀察其消失速度和局部血液循環(huán)變化,作為皮膚血管通透性觀察指標之一。方法是:將動物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮試針頭緊貼皮膚皮層刺入皮內(nèi),然后使針頭向上挑起并再稍刺入,即可注射藥液。注射后可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注射 當給動物注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時,常采用肌肉注射。肌肉注射一般選用肌肉發(fā)達、無大血管經(jīng)過的部位,多選臀部。
注射時針頭要垂直快速刺入肌肉,如無回血現(xiàn)象即可注射。給大、小鼠作肌肉注射時,選大腿外側(cè)肌肉進行注射。
4. 腹腔注射 先將動物固定,腹部用酒精棉球擦試消毒,然后在左或右側(cè)腹部將針頭刺入皮下,沿皮下向前推進約0.5厘米,再使針頭與皮膚呈45 度角方向穿過腹肌刺入腹腔,此時有落空感,回抽無腸液、尿液后,緩緩推入藥液。此法大小鼠用的較多。
5. 靜脈注射 是將藥液直接注射于靜脈管內(nèi),使其隨著血液分布全身,迅速奏效。但排泄較快,作用時間較短。
小鼠、大鼠的靜脈注射:常采用尾靜脈注射。鼠尾靜脈共有3根, 左右兩側(cè)和背側(cè)各1根,兩側(cè)尾靜脈比較容易固定,故常被采用。操作時,先將動物固定在暴露尾部的固定器內(nèi)(可用燒杯、鐵絲罩或粗試管等物代替),用75%酒精棉球反復擦試使血管擴張, 并可使表皮角質(zhì)軟化,以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè),使靜脈充盈,注射時針頭盡量采取與尾部平行的角度進針。開始注射時宜少量緩注,如無阻力,表示針頭已進入靜脈,這時用左手指將針和尾一起固定起來,解除對尾根部的壓迫后,便可進行注射。如有白色皮丘出現(xiàn),說明未穿刺入血管,應重新向尾部方向移動針頭再次穿刺。注射完畢后把尾部向注射側(cè)彎曲以止血。如需反復注射,盡量從尾的末端開始。 一次的注射量為每10g體重0.1-0.2ml。
豚鼠的靜脈注射:一般采用前肢皮下頭靜脈。鼠的靜脈管壁較脆,注射時應特別注意。
兔的靜脈注射:一般采用外耳緣靜脈,因其表淺易固定。注射部位除毛,用75%的酒精消毒,手指輕彈兔耳,使靜脈充盈,左手食指和中指夾住靜脈的近心端,拇指繃緊靜脈的遠心端,無名指及小指墊在下面,右手持注射器,盡量從靜脈的遠端刺入血管,移動拇指于針頭上以固定,放開食、中指,將藥液注入,然后拔出針頭,用手壓迫針眼片刻以止血。
狗的靜脈注射:狗的靜脈注射多采用前肢外側(cè)靜脈或后肢外側(cè)的小隱靜脈。注射部位除毛后,在靜脈血管的近心端用橡皮帶扎緊,使血管充盈,從靜脈的遠心端將注射針頭平行血管刺入,回抽注射器針栓,如有回血,即可放開像皮帶,將藥液緩緩注入。
6. 淋巴囊注射 蛙類常采用此法,其皮下有數(shù)個淋巴囊,注入藥物甚易吸收。腹部淋巴囊和頭部淋巴囊常作為蛙類給藥途徑。一般多選用腹部淋巴囊給藥。注射時將針頭從蛙大腿上端刺入,經(jīng)大腿肌層入腹壁肌層,再進入腹壁皮下,即進入淋巴囊,然后注入藥液。
(二)經(jīng)口給藥法
1. 口服法:把藥物放入飼料或溶于飲水中讓動物自動攝取。此法優(yōu)點在于簡單方便,缺點是不能保證劑量準確。一般適用于對動物疾病的防治或某些藥物的毒性實驗,制造某些與食物有關(guān)的人類疾病動物模型。
2. 灌胃法:在急性實驗中,多采用灌胃法。此法劑量準確。灌胃法是用灌胃器將所應投給動物的藥灌到動物胃內(nèi)。灌胃器由注射器和特殊的灌胃針構(gòu)成。小鼠的灌胃針長約4~5cm,直徑為1mm,大鼠的灌胃針長約6~8cm,直徑約1.2mm。灌胃針的尖端焊有一小圓金屬球,金屬球為中空的。焊金屬球的目的是防止針頭刺入氣管或損傷消化道。針頭金屬球端彎曲成20°左右的角度,以適應口腔、食道的生理彎曲度走向。
鼠類的灌胃法:用左手固定鼠,右手持灌胃器,將灌胃針從鼠的口腔插入,壓迫鼠的頭部,使口腔與食道成一直線,將灌胃針沿咽后壁慢慢插入食道,可感到輕微的阻力,此時可略改變一下灌胃針方向,以刺激引起吞咽動作,順勢將藥液注入。一般灌胃針插入小鼠深度為3~4cm,大鼠或豚鼠為4~6cm。常用灌胃量小鼠為0.2~1ml,大鼠1~4ml,豚鼠1~5ml。
狗、兔的灌胃法:先將動物固定,再將開口器的小孔插入動物口中,再慢慢沿上鄂壁插入食道,將灌胃管的外端浸入水中,如有氣泡逸出,則說明灌胃管誤入氣管,需拔出重插。插好后,將注射器連于灌胃管將藥液推入。灌胃結(jié)束后,先拔出灌胃管,再拿出開口器。一次灌胃能耐受的最大容積兔為80~100ml,狗為 200 ~250ml。
(三)其它途徑給藥方法
1. 呼吸道給藥:呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等狀態(tài)的藥物或毒氣,均需要通過動物呼吸道給藥。如實驗時給動物乙醚作吸入麻醉、用鋸末煙霧制作慢性氣管炎動物模型等,特別在毒理學實驗中應用更為廣泛。
2. 皮膚給藥:為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、 致敏作用和光感作用等,均需采用經(jīng)皮膚給藥方法。如兔和豚鼠常采用背部一定面積的皮膚脫毛后,將一定的藥液涂在皮膚上,藥液經(jīng)皮膚吸收。
3. 脊髓腔內(nèi)給藥:此法主要用于錐管麻醉或抽取腦脊液。
4. 腦內(nèi)給藥:此法常用于微生物學動物實驗,將病原體等接種于被檢動物腦內(nèi),然后觀察接種后的各種變化。
5. 直腸內(nèi)給藥:此種方法常用于動物麻醉。兔直腸內(nèi)給藥時,常采用灌腸的膠皮管或用14號導尿管代替。
6. 關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥:此法常用于關(guān)節(jié)炎的動物模型復制。