當實驗中途停止或結(jié)束時,實驗者應站在實驗動物的立場上以人道的原則去處置動物,原則上不給實驗動物任何恐怖和痛苦,也就是要施行安樂死。安樂死是指實驗動物在沒有痛苦感覺的情況下死去。實驗動物安樂死方法的選擇取決于動物的種類與研究的課題。
一、蛙 類
常用金屬探針插入枕骨大孔,破壞腦脊髓的方法處死。將蛙用濕布包住,露出頭部,左手執(zhí)蛙,并用食指按壓其頭部前端,拇指按壓背部,使頭前俯;右手持探針由凹陷處垂直刺入,刺破皮膚即入枕骨大孔。這時將探針尖端轉(zhuǎn)向頭方,向前深入顱腔,然后向各方攪動,以搗毀腦組織。再把探針由枕骨大孔刺入并轉(zhuǎn)向尾方,刺入椎管,以破壞脊髓。腦和脊髓是否完全破壞,可檢查動物四肢肌肉的緊張性是否完全消失。拔出探針后,用一小干棉球?qū)⑨樋锥伦?以防止出血。操作過程中要防止毒腺分泌物射入實驗者眼內(nèi)。如被射入時,則需立即用生理鹽水沖洗眼睛。
二、大鼠和小鼠
1. 頸椎脫臼法:右手抓住鼠尾用力向后拉,同時左手拇指與食指用力向下按住鼠頭。將脊髓與腦髓拉斷,鼠便立即死亡。
2. 斷頭法:用剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉,鼠立即死亡。
3. 擊打法:右手抓住鼠尾,提起,用力摔擊其頭部,鼠痙攣后立即死去。或用木錘用力擊打鼠頭部也可致死。
4. 急性大出血法:可采用鼠眼眶動脈和靜脈急性大量失血方法使鼠立即死亡。
5. 藥物致死法:吸入一定量的一氧化碳、乙醚、氯仿等均可使動物致死。
三、狗、兔、豚鼠
1. 空氣栓塞法:向動物靜脈內(nèi)注入一定量的空氣,使之發(fā)生栓塞而死。當空氣注入靜脈后,可在右心隨著心臟的跳動使空氣與血液成泡沫狀,隨血液循環(huán)到全身。如進到肺動脈,可阻塞其分支,進入心臟冠狀動脈,造成冠狀動脈阻塞,發(fā)生嚴重的血液循環(huán)障礙,動物很快致死。一般兔、貓等靜脈內(nèi)注入20~40ml空氣即可致死。每條狗由前肢或后肢皮下靜脈注入80~150ml空氣,可很快致死。
2. 急性失血法:先使動物輕度麻醉,如狗可按每公斤體重靜脈注射硫噴妥鈉20~30mg,動物即很快入睡。暴露股三角區(qū),用鋒利的殺狗刀在股三角區(qū)作一個約10厘米的橫切口,把股動、靜脈全切斷,立即噴出血液。用一塊濕紗布不斷擦去股動脈切口周圍處的血液和血凝塊,同時不斷的用自來水沖洗流血,使股動脈切口保持暢通,動物在3~5分鐘內(nèi)即可致死。采用此種方法,動物十分安靜,對臟器無損傷,對活殺采集病理切片標本是一種較好的方法。
如果處死狗的同時要采集其血液時,則在用硫噴妥鈉輕度麻醉后,將狗固定在狗手術臺上。分離頸動脈,插一根較粗的塑料管,放低狗頭,打開動脈夾,使動脈血流入裝有抗凝血的容器內(nèi),并不斷搖晃,以防血液凝固。
一、蛙 類
常用金屬探針插入枕骨大孔,破壞腦脊髓的方法處死。將蛙用濕布包住,露出頭部,左手執(zhí)蛙,并用食指按壓其頭部前端,拇指按壓背部,使頭前俯;右手持探針由凹陷處垂直刺入,刺破皮膚即入枕骨大孔。這時將探針尖端轉(zhuǎn)向頭方,向前深入顱腔,然后向各方攪動,以搗毀腦組織。再把探針由枕骨大孔刺入并轉(zhuǎn)向尾方,刺入椎管,以破壞脊髓。腦和脊髓是否完全破壞,可檢查動物四肢肌肉的緊張性是否完全消失。拔出探針后,用一小干棉球?qū)⑨樋锥伦?以防止出血。操作過程中要防止毒腺分泌物射入實驗者眼內(nèi)。如被射入時,則需立即用生理鹽水沖洗眼睛。
二、大鼠和小鼠
1. 頸椎脫臼法:右手抓住鼠尾用力向后拉,同時左手拇指與食指用力向下按住鼠頭。將脊髓與腦髓拉斷,鼠便立即死亡。
2. 斷頭法:用剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉,鼠立即死亡。
3. 擊打法:右手抓住鼠尾,提起,用力摔擊其頭部,鼠痙攣后立即死去。或用木錘用力擊打鼠頭部也可致死。
4. 急性大出血法:可采用鼠眼眶動脈和靜脈急性大量失血方法使鼠立即死亡。
5. 藥物致死法:吸入一定量的一氧化碳、乙醚、氯仿等均可使動物致死。
三、狗、兔、豚鼠
1. 空氣栓塞法:向動物靜脈內(nèi)注入一定量的空氣,使之發(fā)生栓塞而死。當空氣注入靜脈后,可在右心隨著心臟的跳動使空氣與血液成泡沫狀,隨血液循環(huán)到全身。如進到肺動脈,可阻塞其分支,進入心臟冠狀動脈,造成冠狀動脈阻塞,發(fā)生嚴重的血液循環(huán)障礙,動物很快致死。一般兔、貓等靜脈內(nèi)注入20~40ml空氣即可致死。每條狗由前肢或后肢皮下靜脈注入80~150ml空氣,可很快致死。
2. 急性失血法:先使動物輕度麻醉,如狗可按每公斤體重靜脈注射硫噴妥鈉20~30mg,動物即很快入睡。暴露股三角區(qū),用鋒利的殺狗刀在股三角區(qū)作一個約10厘米的橫切口,把股動、靜脈全切斷,立即噴出血液。用一塊濕紗布不斷擦去股動脈切口周圍處的血液和血凝塊,同時不斷的用自來水沖洗流血,使股動脈切口保持暢通,動物在3~5分鐘內(nèi)即可致死。采用此種方法,動物十分安靜,對臟器無損傷,對活殺采集病理切片標本是一種較好的方法。
如果處死狗的同時要采集其血液時,則在用硫噴妥鈉輕度麻醉后,將狗固定在狗手術臺上。分離頸動脈,插一根較粗的塑料管,放低狗頭,打開動脈夾,使動脈血流入裝有抗凝血的容器內(nèi),并不斷搖晃,以防血液凝固。