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中性粒細胞堿性磷酸酶活性組織化學檢查法

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-27
1 試劑
  a.固定液:加甲醛10ml于無水甲醇90ml中。
  b.緩沖底質液(須臨用時配制):由10%巴比妥鈉30ml、3.2%β-甘油磷酸鈉30ml、M/10硫酸鎂30ml、2%硝酸鈣45ml及蒸餾水165ml配成。
  c.清洗液:在蒸餾水中加幾滴2%硝酸鈣液。
  d.2%硝酸鈷。
  e.稀硫化銨液:硫化銨1ml加水至80ml。
  f.2%堿性藏紅水溶液。
2 方法
  a.指端取血推片,不宜太薄。
  b.迅速將血片置固定液中固定30秒,然后用清洗液洗數秒鐘。
  c.將已固定的血片放于緩沖底質液內,在37℃水浴中保溫2小時,然后用清洗液洗數秒鐘。
  d.將上述血片依次放入2%硝酸鈷液中5分鐘,用清洗液洗凈,然后移于稀硫化銨液中1分鐘,用清洗液洗凈,最后用2%堿性藏紅水溶液染色16秒,用水洗凈,待干,用顯微鏡油鏡觀察結果。
3 計算方法
  共計數100個中性粒細胞,視其細胞內堿性磷酸酶活力強弱,按Kaplow法五級記分表示。將每級陽性細胞百分比乘以各該級的分數所得分數之和,即為堿性磷酸酶的積分。分級的標準如下:
  a.中性粒細胞胞漿無異常著色或顆粒,為0分。
  b.胞漿內呈彌散的淺棕色,或少許細微顆粒,為1分。
  c.胞漿內有棕色散在顆粒,為2分。
  d.胞漿內有分布不均勻的棕黑色顆粒,為3分。
  e.胞漿內充滿了均勻一致的棕黑色顆粒,或塊狀沉淀,為4分。
 
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