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分泌型IgA的分離與鑒定

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

(一)材料與試劑
1.初乳
2.SephadexG200
3.0.10Mol/L pH6.8PB液
4.0.01Mol/L pH7.4PB液
5.DEAE52
(二)操作方法
1.取初乳20ml,10 000rpm離心10min,棄去表面脂肪層及底部的沉淀物。
2.取乳清過SephadexG200柱(柱規(guī)格為2.50cm×90cm),以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脫,第一峰為IgA(含IgG)。
3. 收集乳液,于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。
4. 將透析液濃縮至5mg/ml以上。
5. 過DE52層析柱,用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脫,洗下蛋白峰為IgG,棄去。
6. 換用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS(0.10Mol/L NaCl)液洗脫,
收集洗脫液 ,即為較純的IgA液。
7. 必要時,可再過一次SephadexG200柱。
8. 濃縮,鑒定

 

 
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