(一)材料與試劑
1.血清
2.飽和硫酸銨溶液
3.洗脫液0.005Mol/L pH7.4PB液
0.025 Mol/L pH7.4PB液
0.01Mol/L pH7.4PBS液(0.14mol/L NaCl)
4.DE52
5.SephadexG150
(二)操作方法
1.取血清倍比稀釋后,加等量飽和(NH4)2SO4溶液,鹽析。
2.離心取沉淀,溶于少量生理鹽水中,透析、除鹽。
3.過DE52柱,以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脫,收集洗脫蛋白峰(IgG),棄去。
4.換以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脫,洗下的蛋白峰主要是IgE。
5.透析除鹽。
6.過G150柱,以0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl)洗脫,收集洗脫液即為純化的IgE。
7. 濃縮、鑒定。