原理
同炭凝,只是載體換為聚苯乙烯乳膠,它是一種由0.6μm~0.7μm的顆粒所組成的膠體溶液,具有良好的吸附蛋白質的性能。
間接乳膠凝集目前已用于鼠疫菌、沙門氏菌、流感桿菌、腦膜炎雙球菌、葡萄球菌腸毒素等的診斷。
材料與試劑
1.聚苯乙烯乳膠
2.免疫血清
3.正常血清
4.標準抗原
5.待檢抗原
6.0.02Mol/L pH8.2硼酸緩沖液
硼砂 6.67g
硼酸 8.04g
H2O 加至 1 000ml
7.生理鹽水
操作方法
1.乳膠液制備 取聚苯乙烯乳膠0.10ml,加滅菌蒸餾水0.40ml,再加pH8.2硼酸緩沖液2ml,混合后即為25倍稀釋的乳膠液。
2.乳膠致敏 在上述乳膠液中滴加稀釋的免疫血清0.20ml~0.70ml,邊加邊搖,當出現肉眼可見的顆粒后,仍繼續加血清,直至顆粒消失,成為均勻的乳膠懸液為止。鏡下檢查應無自凝。使用時,應與一定稀釋度的相應抗原出現陽性反應,與生理鹽水出現陰性反應為合格。加防腐劑后,于冰箱內保存。注意防止冰凍。
同時以正常血清代替免疫血清進行乳膠致敏,以作對照。
3.取潔凈玻板一塊,用玻璃鉛筆劃成小格,滴加待檢樣品0.10ml,再滴加高免血清致敏乳膠0.01ml,以牙簽或火柴桿混勻,在3min內判定結果。
結果判定
“++++”:全部乳膠凝集,成絮狀團塊,液體清亮。
“+++” : 大部分乳膠凝集成較小的顆粒,液體清亮。
“++” : 半量乳膠凝集成細小顆粒,液體混濁。
“+” : 較少量的乳膠凝集成可見的細顆粒,液體混濁。
“-” : 全部乳膠仍為均勻液體,無顆粒。
以“++”作為該反應滴度的終點。