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放射免疫測定胰島素

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-28

材料及試劑

1.胰島素標準品(不同濃度的)

2125 I-胰島素

3.抗血清

4.第二抗體

5.分析試劑 0.05 Mol/L pH7.4 PBS液+1%正常兔血清。

6 -計數儀

7.試管、加樣器、離心機等

操作方法:

1.按表進行。

胰島素RIA測定方法(單位:μu/ml)

標準管

待測管

0

10

20

40

80

160

1

2

試管號

12

34

56

78

910

1112

1314

1516

標準品(不同濃度)

100

100

100

100

100

100

待測血清

100

100

抗血清(二抗)

100

100

100

100

100

100

100

100

分析試劑

100

100

100

100

100

100

100

100

混勻,37溫育2h

125 I-胰島素

100

100

100

100

100

100

100

100

混勻,37溫育1h

第二抗體

100

100

100

100

100

100

100

100

混勻,37反應30min

2.測定和計算 反應完畢后,將各管于室溫3 000 r/ min離心30min,仔細吸取上清液,收集于放射性廢液貯存容器內。用 -計數儀分別測量各管沉淀物(B)的放射性強度(cpm),以兩管的cpm均值表示。再以第12管的cpm值為Bo,分別計算結合率(B%,即B/Bo×100%),用B%為縱坐標,不同濃度胰島素標準品為橫坐標,繪制標準曲線。然后根據待檢管的B%,從標準曲線中即可查得胰島素的相應含量。

 

 
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