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吸附色譜法

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-28
吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑時,由于該吸附劑對不同物質有不同的吸附力而使混合物分離的方法。該法是最早期的一種色譜分離技術,主要應用于某些分子量不大的物質的分離提純,個別的如羥基磷灰石也適用于生物大分子的分離提純,應用范圍比較廣。
  吸附是表面的一個重要性質之一。任何兩相都可以形成表面,其中某相或溶解在某相中的溶質,在該表面的密集現象稱為吸附。在固體與氣體之間、固體與液體之間、液體與氣體之間都可以發生吸附現象。吸附過程是可逆的,被吸附物在一定條件下可以解吸出來,然后再吸附、再解吸,形成一個動態平衡。吸附色譜過程就是不斷地產生吸附與解吸的矛盾統一的過程。
凡是能夠將其他物質聚集到自己表面上的物質,都稱為吸附劑;聚集于吸附劑表面的物質就成為吸附物。
  應用最為廣泛的一種極性吸附劑,主要優點是化學惰性,具有較大的吸附量。硅膠的吸附活性取決于含水量,當含水量小于1%時活性最高,大于20%時吸附活性最低,一般采用含水量10-20%的硅膠。
  用硅膠進行色譜分離時,要提前進行活化和純化。純化即降低硅膠活性,實驗表明,硅膠加入4-20%水后,表面活性部位被純化,樣品溶質在吸附劑上的吸附和解吸過程加快,同時傳質作用得到改善,最終柱效大幅提高。活化是指在150-195℃加熱硅膠,活化覆蓋有第一層小分子的硅膠,提高硅膠對樣品溶質的吸附能力,其缺點是導致硅膠極性上升,產生催化反應或不可逆吸附。
  此外常用的還有:1)氧化鋁 分為堿性氧化鋁、中性氧化鋁和酸性氧化鋁,其吸附活性與含水量關系很大,在一定溫度下除去水分可使氧化鋁活化;2)活性炭 分為粉末活性炭、顆粒活性炭和錦綸活性炭,其吸附能力在水溶液中最強,使用前一般在150℃加熱4-5小時,將吸附的大部分氣體除去,錦綸活性炭則在100℃以下進行。3)聚酰胺 國外稱尼龍,國內稱錦綸,特別適合低分子量化合物的分離,如酚、羧酸、DNP-氨基酸、醌幾芳香族化合物等。4)聚苯乙烯吸附劑 5)磷酸鈣 在無機吸附劑中,磷酸鈣是唯一適用于生物活性高分子物質分離的吸附劑,主要用于蛋白質的色譜分離、也適用于較小分子的核酸如轉運RNA。
 
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