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常用的電泳緩沖液

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-07

緩沖液

使用液

濃貯存液(每升)

tris-乙酸(tae)

1×:0.04mol/l tris-乙酸

50×:242g tris堿

 

0.001mol/l edta

57.1ml冰乙酸

   

100ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

tris-磷酸(tpe)

1×:0.09mol/l tris-磷酸

10×:10g tris堿

 

0.002mol/l edta

15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

   

40ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

tris-硼酸(tbe)a

0.5×0.045mol/l tris-硼酸

5×:54g tris堿

 

0.001mol/l edta

27.5硼酸

   

20ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

堿性緩沖液b

1×:50mmol/l naoh

1×:5ml 10mol/l naoh

 

1mmol/l edta

2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0)

tris-甘氨酸c

1×:25mmol/l tris

5×:15.1g tris

 

250mmol/l 甘氨酸

94g 苷氨酸(電泳級)(ph8.3)

 

0.1% sds

50ml 10% sds(電泳級)

說明:

①tbe溶液長時間存放后會形成沉淀物,為避免這一問題,可在室溫下用玻璃瓶保存5×溶液,出現沉淀后則予以廢棄。

以片都以1×tbe作為使用液(即1:5稀釋濃貯液)進行瓊脂糖凝膠電泳。但0.5×的使用液已具備足夠的緩沖容量。目前幾乎所有的瓊脂糖膠電泳都以1:10稀釋的貯存液作為使用液。

進行聚丙烯酰胺凝膠垂直槽的緩沖液槽較小, 故通過緩沖液的電流量通常較大,需要使用1×tbe以提供足夠的緩沖容量。

②堿性電泳緩沖液應現用現配。

③tris-甘氨酸緩沖液用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳。

2×sds凝膠加樣緩沖液:

100mmol/l tris·hcl(6.8)

200mmol/l二硫蘇糖醇(dtt)

4%sds(電泳級)

0.2%溴酚藍

20%甘油

不含dtt的2×sds凝膠加樣緩沖液可保存于室溫,應在臨用前取1mol/l貯存液現加于上述緩沖液中。

 
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