編者按:在防治傳染性非典型肺炎醫(yī)源性交叉感染措施中,醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全性管理及標(biāo)本的采集、運(yùn)送、檢測(cè)和處理的安全性是十分重要的環(huán)節(jié)。為此,中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)傳染性非典型肺炎實(shí)驗(yàn)室診斷專(zhuān)題委員會(huì)邀請(qǐng)有關(guān)專(zhuān)家召開(kāi)了研討會(huì),并制定了《檢驗(yàn)科SARS標(biāo)本檢測(cè)安全管理指南(暫行)》暫行辦法,供實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)人員在工作中參考。
傳染性非典型肺炎,世界衛(wèi)生組織(WHO)稱(chēng)為“嚴(yán)重急性呼吸道綜合征”(SARS)。SARS是一種起病急、傳播快、病死率高、病因尚未完全確定的傳染病。根據(jù)SARS病原體的高傳染性和嚴(yán)重的致病性,應(yīng)定義為危險(xiǎn)組4病原體(高個(gè)體危險(xiǎn),高群體危險(xiǎn))。為科學(xué)有效地防護(hù)SARS院內(nèi)交叉感染,規(guī)范有序地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作,根據(jù)《傳染病防治法》、《醫(yī)學(xué)臨床實(shí)驗(yàn)室—醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的安全管理》( 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)草案ISO/DIS 15190-2001),結(jié)合我國(guó)實(shí)際情況,特制定本《指南》。 建議作為臨床實(shí)驗(yàn)室在安全性管理及標(biāo)本的采集、運(yùn)送、檢測(cè)和處理中的參考。
一、安全教育與人員職責(zé)
1.科室主任:有責(zé)任對(duì)實(shí)驗(yàn)室全體員工進(jìn)行SARS相關(guān)知識(shí)培訓(xùn)和安全教育,使全體員工充分認(rèn)識(shí)SARS對(duì)人員安全的嚴(yán)重危害性和高度傳染性,具備自我防護(hù)意識(shí)和對(duì)SARS的預(yù)防、消毒、隔離的技術(shù)常識(shí)。為實(shí)驗(yàn)室提供信息和后勤保障。指定一位副主任負(fù)責(zé)科室預(yù)防、消毒、隔離措施的實(shí)施和監(jiān)控,發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)反饋,并提出改進(jìn)措施。
2.安全員:在科主任的領(lǐng)導(dǎo)下,負(fù)責(zé)科室預(yù)防、消毒、隔離措施的指導(dǎo)、實(shí)施和監(jiān)控工作,發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)反饋,并提出改進(jìn)措施。
3.全體員工:在科主任的領(lǐng)導(dǎo)和安全員的具體指導(dǎo)下,做好個(gè)人防護(hù),在工作中認(rèn)真履行好對(duì)SARS的一切預(yù)防、消毒、隔離措施。
4.安全手冊(cè):在實(shí)驗(yàn)室每個(gè)工作站都要準(zhǔn)備SARS專(zhuān)門(mén)的安全手冊(cè)。手冊(cè)應(yīng)包括對(duì)SARS病原體相關(guān)的危險(xiǎn)物處置,以及對(duì)工作區(qū)的通風(fēng)、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的消毒、清潔和滅活作出詳細(xì)說(shuō)明。
5.健康管理:應(yīng)在科室營(yíng)造出團(tuán)結(jié)、奮進(jìn)、安定的氛圍,合理安排工作,充分保證每個(gè)員工良好的心態(tài),健康的身體。
二、實(shí)驗(yàn)室安全要求
1.專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室或SARS工作區(qū):建議有條件的醫(yī)院在發(fā)熱門(mén)診建立獨(dú)立的 SARS專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室,指定專(zhuān)人檢測(cè)。并(或) 在檢驗(yàn)科內(nèi)建立獨(dú)立的SARS專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室或SARS專(zhuān)用工作區(qū),指定專(zhuān)人檢測(cè)。專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室或SARS專(zhuān)用工作區(qū)必須配有生物安全柜。
2.實(shí)驗(yàn)室管理:保持工作室整潔,物品放置有序。做到空氣流通清新,定時(shí)清掃,并做到衛(wèi)生用具專(zhuān)室專(zhuān)用。進(jìn)入專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室工作人員在處理病原體前要經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)培訓(xùn),開(kāi)展工作時(shí)不許外人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。
3.實(shí)驗(yàn)室消毒:(1)空氣消毒:室內(nèi)有人時(shí),首選開(kāi)窗通風(fēng);不能開(kāi)窗時(shí)(如沙塵天氣)安裝大功率排風(fēng)扇(盡量低位)強(qiáng)行通風(fēng),并保證空氣的單向流通;另外,可采用乳酸加熱熏蒸,每日2次。室內(nèi)無(wú)人時(shí)可采用以下消毒方法:①低臭氧紫外線燈消毒:強(qiáng)度>70 UW/cm3 ,照射60 min,每天2~3次。應(yīng)注意安裝適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)罩,避免醫(yī)務(wù)人員發(fā)生電光性眼炎和其他損傷。②化學(xué)消毒:含氯消毒劑:“健之素”1500 mg/L噴灑消毒,用量30 ml/m3,密閉30 min后通風(fēng),每天3次(早、中、晚)。過(guò)氧乙酸:0.5%~1%過(guò)氧乙酸氣溶膠噴霧,用量30 ml/m3,密閉30 min后通風(fēng),每天3次(早、中、晚)。過(guò)氧化氫:0.5%過(guò)氧化氫氣溶膠噴霧,用量30 ml/m3,密閉30 min后通風(fēng),每天3次(早、中、晚)。③有條件的實(shí)驗(yàn)時(shí)可采用靜電吸附式空氣凈化器持續(xù)消毒,室內(nèi)有無(wú)人時(shí)均適用。(2) 地 面、墻壁、門(mén)窗:①墻壁、門(mén)窗消毒:用0.5%~1%過(guò)氧乙酸或“健之素”1500 mg/L噴霧。泥土墻吸液量為150~300 ml/m2,石灰墻為50~100 ml/m2,木板墻為10~50 ml/m2。對(duì)各種墻壁噴灑的消毒劑溶液不宜超過(guò)其吸液量。②地面消毒:用0.5%~1%過(guò)氧乙酸或“健之素”1500 mg/L噴霧。先由外向內(nèi)噴霧1次,用量為50~300 ml/m2,之后再由內(nèi)向外重復(fù)噴霧一次。以上各種方式的消毒處理,作用時(shí)間不少30 min。 (3)檢驗(yàn)臺(tái)、桌面、椅子及門(mén)把等物品:每日用0.2%~0.5%過(guò)氧乙酸或“健之素”1500 mg/L擦試1~2次。(4)檢測(cè)儀器:當(dāng)檢測(cè)儀器完成檢測(cè)后,儀器表面及進(jìn)樣口應(yīng)用2000 mg/L健之素擦拭數(shù)遍.之后再用沖洗劑擦拭或沖洗數(shù)遍,等待下次檢測(cè)。(5)檢測(cè)樣本用具:檢測(cè)樣本過(guò)程中所用一次性耗品在檢測(cè)完成后,經(jīng)10%漂白水浸泡消毒后放入廢物容器內(nèi),再經(jīng)高壓消毒之后,作為廢品丟棄。操作完畢后,工作臺(tái)進(jìn)行消毒,所有用過(guò)的器具用消毒水消毒,再用龍頭水沖洗晾干,放好待用。(6)檢驗(yàn)報(bào)告單:檢驗(yàn)報(bào)告單需經(jīng)過(guò)消毒后方可發(fā)出,可用環(huán)氧乙烷氣體熏蒸,也可用微波爐消毒處理。具體方法是:先將被消毒的報(bào)告單用塑料袋密封,然后在塑料袋外用濕毛巾包裹,放入微波爐內(nèi),用低、中火檔照射5 min。如有條件,建議設(shè)立專(zhuān)門(mén)的清潔區(qū)打印報(bào)告單。(7)安全離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室:離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)將手套,口罩等放置于有“生物廢品”標(biāo)記的容器,經(jīng)高壓消毒后丟棄,并將隔離衣物留在室內(nèi),放在污物袋中消毒。檢測(cè)樣品不能擅自帶離實(shí)驗(yàn)室,如必須移出,應(yīng)妥善覆蓋,以防在轉(zhuǎn)移過(guò)程中污染環(huán)境和他人。實(shí)驗(yàn)室的物品固定使用,未經(jīng)消毒或隔離包裝不得移出實(shí)驗(yàn)室。所用物品需消毒后方可轉(zhuǎn)用。污染物品應(yīng)裝在雙層加厚堅(jiān)固污物袋,消毒后送出銷(xiāo)毀或洗消處理。工作人員在處理傳染性物品之后,離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前要洗手。(8)發(fā)生明顯或可能與傳染物接觸的濺溢及事故時(shí),要立即向科主任報(bào)告,以作出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)評(píng)價(jià),進(jìn)行監(jiān)測(cè)和治療。(9) 在使用紫外線照射消毒和各種化學(xué)消毒劑消毒過(guò)程中,應(yīng)特別注意防止消毒劑對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員和實(shí)驗(yàn)室儀器、物品的損害。
三、人員防護(hù)
1.基本要求:建議臨床檢驗(yàn)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室穿戴工作衣、鞋、帽、口罩、防護(hù)鏡及橡膠手套,著裝規(guī)范;檢驗(yàn)工作后,以0.1%有效氯消毒液泡手1~2 min后用肥皂流動(dòng)水洗手;離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)應(yīng)脫去隔離衣、鞋、帽、口罩及手套。進(jìn)入辦公室或?qū)W習(xí)室應(yīng)脫去工作衣; 禁止將食物、飲料帶入實(shí)驗(yàn)室。
2.為避免交叉污染,檢驗(yàn)人員原則上不直接進(jìn)入病區(qū)采集標(biāo)本,如必須進(jìn)入時(shí),應(yīng)穿隔離衣加一次性防護(hù)服、戴20層棉紗口罩、防護(hù)鏡。接觸污物時(shí)需戴雙層橡膠手套。有條件的實(shí)驗(yàn)室建議檢測(cè)人員戴N95口罩。
3.接觸標(biāo)本者應(yīng)穿雙層隔離衣、戴12層以上棉紗口罩(最好N95口罩)、防護(hù)鏡。接觸污物時(shí)需戴雙層橡膠手套。
4.手與皮膚的消毒:可用0.2% 過(guò)氧乙酸溶液浸泡擦拭,也可用0.5%碘伏溶液(含有效碘5 000 mg/L)涂擦,作用1~3 min。當(dāng)手被血液、體液污染或可能污染后,應(yīng)立即消毒液浸泡后洗手。必要時(shí)用消毒液洗手。如果工作人員在操作過(guò)程中,意外被針刺、刀割或其他形式的割傷,以致傷口與病毒標(biāo)本直接接觸,或者帶病毒樣本碰到皮膚部位,必須用消毒肥皂洗傷口,再用清水沖洗,隨即向有關(guān)負(fù)責(zé)人報(bào)告。若標(biāo)本濺入或接觸到眼粘膜、口粘膜上,立即用滴眼液或漱口液清洗。
四、SARS 標(biāo)本的采集、運(yùn)輸、檢測(cè)、保存、處理
SARS臨床檢測(cè)標(biāo)本包括:體液、血液、分泌物排泄物及組織。 病毒標(biāo)本在標(biāo)本中存活時(shí)間長(zhǎng)于單獨(dú)存在時(shí)間,因此,一切取自SARS患者標(biāo)本均應(yīng)視為帶病毒強(qiáng)傳染性樣品,依據(jù)傳染病法處理。
1.標(biāo)本的采集:詳細(xì)登記有關(guān)病例的姓名、性別、年齡等基本信息,發(fā)病日期、采樣日期等。(1) 尿液標(biāo)本的采集:將2~5 ml 尿液裝入帶蓋收集容器內(nèi),蓋緊蓋子,加注特別標(biāo)識(shí)(建議紅色SARS字樣),密封送檢。(2)分泌物的采集:體液標(biāo)本極具傳染性,原則上盡量減少此類(lèi)標(biāo)本采集和檢測(cè)。① 咽拭子:用無(wú)菌濕棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,再將棉簽放入無(wú)菌試管中,加注特別標(biāo)識(shí),密封送檢。② 痰液:讓患者直接將痰液咳入無(wú)菌平皿中,加注特別標(biāo)識(shí),密封送檢。(3)糞便標(biāo)本的采集:將10~50 cm3的糞便裝入糞便杯或尿液收集容器內(nèi),蓋緊蓋子,加注特別標(biāo)識(shí),密封送檢。(4) 血液標(biāo)本的采集:建議血液標(biāo)本一律使用負(fù)壓靜脈采血,不使用末梢血,以免在采集過(guò)程中造成更大范圍的污染。標(biāo)本采集后加注特別標(biāo)識(shí),密封送檢。
2.標(biāo)本的運(yùn)輸:送檢的標(biāo)本,要求密封包裝,放在專(zhuān)門(mén)為運(yùn)輸用的容器內(nèi),加蓋,由專(zhuān)人運(yùn)送。運(yùn)送過(guò)程中嚴(yán)防遺撒。送入檢驗(yàn)科,由專(zhuān)人簽收。
3.標(biāo)本前處理:任何有可能產(chǎn)生細(xì)顆粒氣溶膠的操作步驟,標(biāo)本處理原則上在有合格證的生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,普通平流超凈臺(tái)不適于SARS 標(biāo)本的處理。處理標(biāo)本使用專(zhuān)用離心機(jī),離心時(shí)應(yīng)使用密閉的離心機(jī)轉(zhuǎn)頭或密閉樣品杯。理想情況下,應(yīng)在生物安全柜內(nèi)取出離心機(jī)轉(zhuǎn)頭或樣品杯。離心機(jī)使用完畢,立即用1 500 mg/L健之素進(jìn)行表面消毒。
4.標(biāo)本的檢測(cè):實(shí)驗(yàn)室工作人員做好個(gè)人防護(hù)措施。標(biāo)本盡量集中專(zhuān)用區(qū)域內(nèi)由專(zhuān)人進(jìn)行檢測(cè),以便于標(biāo)本、儀器、環(huán)境集中消毒和處理。盡量避免標(biāo)本分散到多個(gè)實(shí)驗(yàn)室。
(1)下列操作必須在生物安全3級(jí)(BSL3)或以上級(jí)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行:用細(xì)胞培養(yǎng)的方法分離病毒;收集或濃縮病毒或其培養(yǎng)產(chǎn)物;用活病毒或病毒的全基因接種動(dòng)物;咽拭子樣品的診斷檢測(cè)。
(2)下列操作必須在生物安全2級(jí)(BSL2)或以上級(jí)實(shí)驗(yàn)室或全排式生物安全柜中進(jìn)行:含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測(cè);溶解、固定或用其他方法處理滅活的病毒和(或)無(wú)傳染性的的病毒基因片斷;常規(guī)的細(xì)菌和毒素檢查;可能產(chǎn)生氣溶膠的樣品處理;臨床樣品的包裝、分裝;離心管和離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的封閉和開(kāi)啟。
5.檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告:以實(shí)現(xiàn)計(jì)算及網(wǎng)絡(luò)化的醫(yī)院建議采用網(wǎng)絡(luò)信息報(bào)告,由接收單位打出報(bào)告單,盡量不從有SARS 標(biāo)本污染的實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)出報(bào)告單。如確需由實(shí)驗(yàn)室發(fā)報(bào)告單,必須確保報(bào)告單消毒完全后再發(fā)放。
6.標(biāo)本檢測(cè)后處理:(1) 檢測(cè)后標(biāo)本(痰、咽拭子、糞便、尿液、血)以及檢測(cè)過(guò)程中所使用過(guò)的污染廢棄物(試管、痰盒、尿杯等)一律集中放入帶蓋專(zhuān)用污物桶內(nèi),用2 000 mg/L健之素或0.5%過(guò)氧乙酸消毒劑覆蓋或混勻,作用10 min以上,然后高壓30 min,取出后,直接焚燒。每4 h消毒處理1次。(2) 廢液:所有廢液(包括儀器檢測(cè)后廢液)都用2 500 mg/L健之素浸泡1 h以上,高壓,再送到醫(yī)院污水站合理消毒處理。注意保證污水氯余量大于6.5 mg/L.
7.標(biāo)本的保存:分析前標(biāo)本根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要合理保存。分析后已發(fā)出報(bào)告的標(biāo)本原則上不保存;如有特殊需要保存的標(biāo)本,應(yīng)保存在加鎖的專(zhuān)用冰箱,專(zhuān)人管理并作特殊紀(jì)錄。杜絕將SARS 標(biāo)本放入普通冰箱內(nèi),以免造成其他物品的污染。
注:參與本《指南》制定的專(zhuān)家有(按單位筆劃排序):上海復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院 潘伯申教授,衛(wèi)生部中日友好醫(yī)院 張遠(yuǎn)春 主任、于雪瑩博士,北京大學(xué)人民醫(yī)院張正教授,北京地壇醫(yī)院 趙輝、肖元樸教授,北京佑安醫(yī)院 閔福援教授,北京軍區(qū)總院 王北寧主任,江蘇省人民醫(yī)院 童明慶主任,解放軍總醫(yī)院 叢玉隆、秦小玲教授,解放軍第三0二醫(yī)院 毛遠(yuǎn)麗教授。